实验须知和分光光度计的使用实验须知和分光光度计的使用.pptVIP

实验须知和分光光度计的使用 生化与分子生物学教研室 五、分光光度计原理 任何物质对光线都有吸收，而且每种物质都有其特有的吸收光谱。 相同物质在同一条件下，其吸收光谱的强度－吸光度 （A absorb ）与该物质的含量成正比例关系。因此把根据物质吸收光谱的特性进行定性或定量分析的方法称为吸收光谱法或分光光度法。 朗伯－比尔（Lambert-Beer）定律： A＝-logI/I0=-logT=KCL A：光密度，吸光度，消光度。 　I：透过光强度。 I0：入射光强度。 T：透光度 　K：消光系数。 C：溶液浓度。 L：溶液厚度。 吸光度与溶液的浓度和液层的厚度的乘积成正比 ７２１-Ｅ型分光光度计使用步骤 2.调到指定波长 4.放入黑体对光，调Ｔ＝０，拿出黑体 5.将空白液、标准液、待测液按顺序放入比色杯架，空白液置于光路中。 6.T=100% ；A=0 7.按Ｍｏｄｅ至Ａ，关盖，拉动比色槽，进行记录 8.取出比色杯，清洗 9.调Ｍｏｄｅ至Ｔ，比色槽归位 六、用分光光度法测定硫酸铜的浓度 硫酸铜标准液：4% 硫酸铜吸收峰：650nm * * 一、学生实验守则 实验前应认真预习，明确实验目的、步骤，回答老 师的提问。 进入实验室必须保持安静，不准高声谈笑，注意 环境卫生，不准吸烟，不随地吐痰，不乱抛纸屑