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K004 固定化脂肪酶膜反应器合成棕榈酸异辛酯 陈必强 谭天伟 （北京化工大学生命科学与技术学院北京 100029） 要 开发了一种新型的固定化脂肪酶膜反应器合成棕榈酸异辛酯。假丝酵母脂肪酶Candida 2 sp.99-125 以吸附的方式固定在表面改性的纺织物膜上(130 IU/cm ) 。在5L 的反应器中对反应时 间、温度，底物摩尔比及搅拌转速等反应条件进行了考察，得到了最优的反应条件。底物摩尔比 为异辛醇：棕榈酸= 1.3：1，脂肪酶用量为5000-6000IU/g 膜， 40 ℃反应12h，酯化率达到97% 。 反应器连续运转21 批，反应酯化率仍然维持在92% 以上。分离纯化后产品纯度达到98% 。 关键词 棕榈酸异辛酯 固定化脂肪酶 反应器 合成 引言 棕榈酸异辛酯Isooctyl Palmitate (IOP) ，又称棕榈酸2-乙基己酯[1]，是一种重要的非离 子表面活性剂，广泛应用于化妆品、纺织及其它化工行业[2-4] 。目前工业上生产棕榈酸异辛 酯主要为化学法合成。 相对于传统的化学合成，利用脂肪酶在非水相中催化合成脂肪酸酯有许多的优势[5-6]， 譬如反应条件温和、能耗低等等。近年来的大量研究工作表明，一些简单的工艺技术可以被 用于制备高活性的生物催化剂并在有机溶剂中得到应用[7]，以实现低成本和规模化生产的 目标。通过酶的固定化有利于酶的分散、回收和再利用。脂肪酶的固定化有多种方法，物理 吸附因成本低、简单、容易保持美的特异性等特点而受到重视[8]。本文利用吸附法将脂肪 酶固定在纺织物膜上，并 成固定化酶反应器，对其催化合成棕榈酸异辛酯的反应条件和酶 的稳定性进行了研究。 1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 试剂 假丝酵母脂肪酶Candida sp.99-125 本实验室自制，每克干粉240000u ），原料与试剂 均为市售分析纯产品。 1.1.2 仪器 酶反应器装置 实验室自行研制），高效液相色谱仪：Alltech 426 型泵及Alltech 色谱 数据工作站，Alltech 2000 型蒸发光散射检测器 ELSD ）。 1.2 方法 1.2.1 固定化脂肪酶膜的制备 以织物膜为载体，吸附法制备。10g 载体先与 10ml 含 0.1% (W/V) 吐温 80、0.2% (W/V)PEG6000、0.2%(W/V) 明胶的共固定剂溶液混合，晾干后，将其与10ml 酶液 5000～ 10000IU/ml ）充分混匀，室温晾干后待用。 联系人：谭天伟. 第一作者：陈必强，男，24 ，博士. Email: twtan@buct.mail.edu.cn 1.2.2 固定化脂肪酶膜反应器中棕榈酸异辛酯的合成 5L 的固定化酶膜反应装置如图1 所示：酶膜固定在不锈钢丝网上，以卷绕的 式放入 反应器中。可 成多层卷筒，以增加反应的催化面积。酶布质量30g，酶活6000IU/g （酶布 2 2 面积约1350cm ，130IU/ cm ）。200g 棕榈酸，101g 异辛醇，溶剂用量为1500ml 石油醚加入 反应器开始反应，反应温度由循环水浴控制为40 ℃。 1.2.3 酯化率的测定 用0.2mol ·L-1 的NaOH 溶液滴定反应液中剩余的棕榈酸。以反应体系内酯化所减少的 棕榈酸的量计算酯化率：酯化率 反应的棕榈酸质量/初始加入的棕榈酸的质量×100%。 1.2.4 产物的分析 分离纯化后的产物用高效液相色谱分析，HPLC 条件如下： 色谱柱：Alltima C-18 5 μ，250 ㎜×4.6 ㎜ 检测器: ELSD,1.7 L/min，70℃ 流动相：乙腈和二氯甲烷的二元梯度洗脱 2 结果与讨论 2.1 酯化反应进程 酶反应装置如图1，反应条件为：200g 棕榈酸，101g 异辛醇，底物摩尔比为 alcohol