2-现代分析测试技术-分离.pdf

2 分离与纯化 2.1 色谱分离法 n 按固定相所处的状态分类： n 柱层析：将固定相装填在金属或玻璃制成的管 柱中，做成层析柱以进行分离的，为柱层析； n 毛细管色谱：把固定相附着在毛细管内壁，做 成色谱柱的，为毛细管色谱。 n 纸层析：利用滤纸作为固定相以进行层析分离 的为纸层析。 n 薄层层析：把吸附剂粉未铺成薄层作为固定相 以进行层析分离的为薄层层析。 按色谱分离的原理分类 n 吸附色谱：固定相为吸附剂，利用它对被分离组分吸 附能力强弱的差异来进行分离。气固色谱和液固色谱 属于这一类。 n 分配色谱：是利用各个被分离组分在固定相和流动相 两相问分配系数的不同来进行分离的，气液层析和液 液层析属于这一类。 n 离子交换色谱：以离子交换剂作固定相，利用各种组 分的离子交换亲和力的差异来进行分离。 n 凝胶色谱：又称排阻色谱：用凝胶作固定相，利用凝 胶对分子大小不同的组分所产生阻滞作用的差异未进 行分离。 吸附柱色谱K =Cs/Cm D 由吸附剂表面对液体中各组分 吸附能力(K )不同，而按一定 D 顺序吸附，从而将各组分分 开。 固定相 （吸附剂） 流动相 （洗脱剂） 吸附剂 n 粒度均匀的细小颗粒 n 较大的表面积和一定的吸附能力 n 吸附剂与欲分离的试样和所用的洗脱剂不起化学反 应， n 不溶于洗脱剂中 n 常用的吸附剂有 n 氧化铝 n 硅胶 n 聚酰胺 氧化铝 n 氧化铝具有吸附能力强、分离能力强等优点。 n 中性氧化铝 适用于醛、酮、醌、酯、内酯化合物及某些苷的分离 n 酸性氧化铝 适用于酸性化合物，如酸性色素、某些氨基酸，以及 对酸稳定的中性物质的分离 n 碱性氧化铝 适用于分离碱性化合响如如生物碱、醇以及其它中性 和碱性物质 氧化铝的活化 n 活性和含水量密切有关 n 活性强弱用活度级I～V级来表示，活度I 级吸附能力最强，V级最弱。 n 通过加热至不同温度，可以改变氧化铝 的活性, n 分离弱极性的组分选用吸附活性强一些 的吸附剂，分离极性较强的组分，应选 用活性弱的吸附剂 硅胶 n 硅胶具有微酸性 n 吸附能力较氧化铝稍弱 n 可用于分离酸性和中性物质，如有机 酸、氨基酸、萜类、甾体等。 硅胶的化学组成 n 硅氧烷不具吸附性 n 硅醇基能与极性化合物或不饱和化合物形成氢键，因 而具有吸附性 n 其中活泼型硅醇基构成最强烈的吸附中心，游离型次 之，束缚型又次之 n 表面空穴较小的硅胶吸附性能较强 硅胶的活化 n 水与硅胶表面的羟基结合成水合硅醇：Si— 0H.0H ，使其失去吸 2 附性能 n 加热至100℃左右能可逆地除去这些水分，使硅胶活化 n 最佳的活化条件为：105～110℃，加热30min n 如果加热至200℃以上，则硅胶逐渐失去结构水，形成硅氧烷， 吸附能力下降 n 加热至400℃以上，硅胶的表面积逐渐变小，以至于烧结。 聚酰胺 n 由已内酰胺聚合而成，又 称聚己内酰胺 n 聚酰胺分子内存在着很多 的酰胺键，可与酚类、酸 类、酮类，硝基化合物等 形成氢键，因而对这些物 质有吸附作用 n 酚类和酸类以其羟基或羧 基与酰胺键的羰基形成氢 键 n 芳香硝基化合物和醌类化 合物是以硝基或醌基与酰 胺键中游离胺基形成氢键 聚酰胺吸附规律 n 能形成氢键基团较多的溶质，其吸附能力较大 n 对位、间位取代基团都能形成氢键时，吸附能力增大 n 邻位的使吸附能力减小 n 芳香核具有较多共轭双键时，吸附能力增大 n 能形成分子内氢键者，吸附能力减小 流动相及其选择 n 流动相的洗脱作用实质上是流动相分子与被分离的溶 质分子