CovarisM220-DNAShearing用户培训手册pdf.PDFVIP

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CovarisM220-DNAShearing用户培训手册pdf

Covaris M220 高性能样品处理系统 培训手册 基因有限公司生命科学组 二o 一二 年 三 月 目 录 一、Covaris M220 高性能样品处理系统技术特点 二、 系统安装条件 三、培训所需试剂设备及样品 四、安装及调试安排 五、培训程序及时间安排 六、仪器及试剂系统介绍 七、实验操作流程 八、仪器使用注意事项 九、常见问题处理 十、附录 一.Covaris 高性能样品处理系统技术特点 Covaris 高性能样品处理系统是在专利技术——自动声波聚焦(AFA )技术的基础上建 立起来的样品处理平台。该技术整合了非线性、高强度、汇聚性声学冲击波和高级计算机控 制系统,其圆盘状传感器可将声波能量聚焦在样品上,通过等温、非接触的方式对样品进行 声学匀浆、分解和混匀。而且,此系统的聚焦声能是可控,可根据应用范围和样品量选择波 频率和波形,以控制聚焦带的尺寸和声波强度,且声学优化的样品容器也可根据声波聚焦带 进行调整。另外,系统处理的水浴环境可维持均一的处理温度,适用于对温度敏感的生物样 本。 技术原理 介于 20Hz~20kHz 的机械波振动在弹性介质中的传播就形成声波,介于 20kHz~ 500MHz 的称为超声波,超声波的传播速度就是声波的传播速度,而超声波具有波长短, 易于定向发射和会聚等优点。AFA 技术利用几何聚焦声波能量,通过0.5MHz 的球面固态超 声传感器可将波长为1mm 的声波能量聚焦在样品上,不仅可以控制波形,而且自动聚焦的 能量无损失,且可直接作用于管内样品上。 系统特点: 1. 非接触式样品处理,无污染和交叉反应,且不用清洁探头 2. 等温处理,不会产生过热现象而破坏样本的生物活性 3. 可精确控制样本处理过程,重复性高 4. 自动聚焦的能量无损失,直接作用于管内样品上 应用领域 适用100bp-3kb 大小的DNA 目的片段剪切 二. 系统安装条件 1. 位置要求:稳定水平的操作平台放置设备,远离热源,避免阳光直射 2. 空间及载重要求: 操作平台尺寸(长×宽×高):12” W x 17” D x 10” H (30cm x 43cm x 25cm) (平台下预留空 间放置环路冷却/加热装置),仪器周围要留出至少3cm空隙,以方便散热。 操作平台载重:10kg 3. 温度要求:15-30℃ 4. 水浴要求: 双蒸水或去离子水,仪器操作温度范围6-40℃ (要求水浴范围2-55℃) 用户如自备水浴,需要准备冷却/加热循环装置所需的软管; 建议采用covaris 水环境系统(WCS )来维持高通量应用过程的水纯度。 5. 电源:100-240 VAC 500 VA, 50-60Hz 。 6. 电脑:操作系统要求Microsoft Windows 7 7. 其它:通用插头接线板 三.培训所需试剂设备及样品 尊敬的用户,培训实验以DNA Shearing with microTUBEs (1.5kb fragments)为例,请提 前准备以下物品,我公司培训人员将使用以下物品进行仪器使用的培训工作。 1. 所需样品和试剂 λDNA 或基因组DNA (全长 50kb,浓度20-35ng/ul ,体积130ul,A260/A280=1.8-2.0 ): 将λDNA 用Tris EDTA (pH8.0 )buffer 稀释到20ng/ul ,使用前可用核酸测定仪进行浓度及 纯度核对,注意保证完全溶解。 500bp 及 2kb 的 ladder (DL2000 ),Tris EDTA (pH 8.0 )buffer ,1×TAE 电泳缓冲液, DNA 上样缓冲液(溴酚兰),1%琼脂糖胶,溴化乙锭(EB) 。 2. 耗材 (1) holder (Part No.500114 )一个; (2) (6x16mm) 100 μl tube with AFA fiber snap-caps (Part No.520045)若干; (3) PrepStation (Part No.500142 )一个。 或者准备一个试剂盒DNA Shearin

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