中草药消毒剂杀菌效果的研究.docVIP

中草药消毒剂杀菌效果的研究 中国畜牧兽医2010年第37卷第11期经验交流?227? 中草药消毒剂杀菌效果的研究 王金和,边传周,金登宇,陈益 (郑州牧业工程高等专科学校,郑州450011) 摘要:为研究中草药消毒剂的杀菌效果,选取大黄,艾叶等中草药在实验室制备了复方中草药消毒剂,并对其进行了定量 杀菌试验,l床现场消毒试验等研究.结果表明,以大黄,艾叶等中草药组方的中草药消毒剂对金黄色葡萄球菌作用】0rain, 杀灭率达99.9,作用30min,可达100;对大肠杆菌作用10min以上,杀灭率达100;对枯草芽孢杆菌作用15min以上杀 灭率达99.9;表面现场消毒对细菌杀灭率达99.96;54温箱中放置14d后,杀菌效果基本不变;有机物的存在对消毒效 果有一定影响.结果提示中草药消毒剂用于养殖场消毒稳定有效,并可进行相关消毒剂的开发. 关键词:中草药消毒剂;金黄色葡萄球菌;大肠杆菌;枯草芽孢杆菌;杀菌效果 中图分类号:S53.75文献标识码:B文章编号:1671—7236(201O)110227—03 临床消毒剂种类很多,常用的兽用消毒药主要 是酚,醛,醇,酸,碱,氯制剂,碘制剂,重金属盐类,表 面活性剂等类型消毒剂.这些消毒剂不同程度地存 在污染环境,药物残留,产生抗药性,部分属于原浆 毒等副作用,制约了它们的广泛应用(高慧等, 2002).而中草药消毒剂对环境无污染,无刺激性和 安全,符合研制和开发环保消毒剂的发展趋势.胡 晓蕙等(2002)对一种主要由野菊花,厚朴等制成的 水提剂预防上呼吸道感染进行观察,结果表明,空气 中的病原微生物,可降低上呼吸道感染发病率;孟庆 增等(1998)用蟾酥,苦参,蛇床子等中药提取液配制 成蟾酥复方消毒剂,在实验室对其杀灭微生物效果 进行了试验观察,结果表明,蟾酥复方消毒剂对金黄 色葡萄球菌和大肠杆菌作用5min,对白色念珠菌 作用2min,杀灭率为99.99～100.本试验通 过在实验室选择具有抗菌作用的中草药制备成中草 药消毒剂,在实验室和养殖场对其杀菌效果及稳定 性进行研究. 1材料与方法 1.1中草药消毒剂的制备取大黄,艾叶,丹皮,蛇 床子,大青叶,苦参,五倍子等中草药分别混碎,按照 一 定比例混合装入中药提取罐中,加入一定量水后 收稿日期:2010-04—21 作者简介:王金和(】971一),男,河南人,讲师,硕士,主要从事 预防兽医教学与科研工作. 通信作者:边传周(1966一),男,河南人,教授,博士,主要从事 预防兽医教学科研管理工作. 基金项目:河南省科技发展计划重点项目《牧场生物消毒剂的 研究与应用》(0921023lO145). 加热煮沸,放出提取液,再加水加热煮沸,放出提取 液,2次提取液合并后微滤,微滤液放入低温浓缩装 置中浓缩即得消毒剂. 1.2中和剂选择试验试验菌株为大肠杆菌8099 (源于中国兽医药品监察所),将试验菌株连续传代 培养至第3代,用灭菌生理盐水制成约lO.CFU/ mL的菌液;中和剂为含2.0卵磷脂,3吐温一80, 0.5硫代硫酸钠的PBS.试验分6组:分别为消毒 剂+菌悬液,(消毒剂+菌悬液)+中和剂,中和剂+ 菌悬液,(消毒剂+中和剂)+菌悬液,稀释液+菌悬 液,稀释液+中和剂+培养基.将以上各组混合液 各取0.5mL倾注平皿,37培养48h,计算菌 落数,按稀释倍数计算回收菌数(CFU/mL);3, 4,5组间菌落数误差率及试验所用试剂按《消毒 拄术规范》(卫生部,2002)计算和配制.试验重 复3次. 1.3定量杀菌试验试验菌包括金黄色葡萄球菌 (郑州牧业工程高等专科学校微生物实验室),枯草 杆菌黑色变种芽孢ATCC9372(中国兽医药品监察 所),大肠杆菌8099.在(20±1)水浴环境条件下 进行定量杀菌试验,试验分试验组和对照组.分别 取0.5mL细菌悬液剂与4.5mL消毒剂(对照组用 PBS代替)混匀,消毒剂作用至5,10,15,30rain;分 别取0.5mL混合液加入含4.5mL中和剂溶液的 试管中,中和作用10min;去除消毒剂后,取1.0mL 样液接种平皿,倾注培养基并涂布均匀,于37恒 温培养24～72h(大肠杆菌24h,金黄色葡萄球菌 48h,枯草芽孢杆菌72h),计菌落数,计算杀灭率. 杀灭率及试验所用试剂按《消毒拄术规范》计算和配 ? 228?经验交流中国畜牧兽医2010年第37卷第l1期 制.试验重复3次. 1.4有机物影响试验在金黄色葡萄球菌菌液中 加小牛血清至10,15及20,用不含小牛血清 的菌液做对照,检测有机物对消毒剂杀菌效果 的影响. 1.5稳定性试验取原液6份.3份用于保存前 测定杀菌效果,另3份置54.C温箱保存至第14天 时,同样方法测定其对金黄色葡萄球菌的杀灭效果. 1.6表面现场消毒试