五 呼吸系统标本微生物检验.pptVIP

* 五 呼吸系统标本 下呼吸道的痰液是无细菌的，而经口腔咳出的痰带有多种上呼吸道的正常寄生菌（如草绿色链球菌）。若从患者痰标本中查见致病菌或条件致病菌，提示有上呼吸道感染。 常见的病原菌主要有肺炎链球菌、A群链球菌、金黄色葡萄球菌、卡他布兰汉菌、白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌和军团菌。 （一）标本采集 时间晨痰，且在取痰前用清水反复漱口。 1. 标本采集方法 (1) 自然咳痰法 最常用的方法 (2) 气管镜下采集法 (3) 气管穿刺法 (4) 结核分枝杆菌标本收集法：收集24H痰液以提高阳性检出率。 （5）小儿取痰法 压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受刺激咳嗽，可咳出肺部气管分泌物黏在拭子上. 2、保存于运输 取材后立即送检。结核杆菌和真菌培养时不能及时送检，4度保存。 检验方法和操作流程 1. 肉眼观察 2. 涂片检查 其一依据100×镜下观察白细胞和上皮细胞数目多少来评定(如表)；其二是初步判定是否有病原存在。 痰标本镜下分类 注：A、B两种情况的痰标本适合做培养，C不合适，应重新留标本 操作流程 （1）一般细菌涂片 脓性或血性制成薄涂片，革兰染色镜检 （2）结核分枝杆菌涂片 干酪样痰液制成厚涂片，抗酸染色镜检 （3）放线菌及诺卡菌涂片 生理盐水反复洗涤数次。如含血痰液加蒸馏水溶解，挑取黄色颗粒（硫磺颗粒）或不透明着色斑点，加压盖片，高倍镜观察。 如见到末端粗杆状呈放线排列，在做抗酸及革兰染色 3. 培养 （1）培养标本的选择：应选择粘液痰作涂片。 （2）痰标本培养前处理：痰液加入生理盐水15~20ml，震荡15~20秒后静置，将痰液放入另一个试管，再次用无菌盐水将痰洗涤3次， 痰液均质化，加入等量的1%胰酶溶液（PH7.6)，37oC水浴90min，使痰液均质化后备用。 2）结核杆菌培养 处理后痰液接种于改良罗氏培养基，35度培养，第一周观察2次，以后每周一次。 3）肺团菌属培养 均质化痰液接种于血琼脂，巧克力琼脂和BCYE琼脂平板上。35度5~10%CO2培养。 生长小于24小时，不是军团菌。大于24小时，只在BCYE琼脂生长，可能是军团菌。 4）厌氧菌培养 *