DRE2基因参与酵母内质网应激调控机制的初步研究.pdfVIP

4l72 重庆医学2014年 11月第 43卷第31期 论著 ·基础研究 doi：10．3969／j．issn．1671—8348．2014．31．018 DRE2基因参与酵母 内质网应激调控机制的初步研究 赵 炜 ，牛宇杰 ，袁 源 ，刘新光 △ (1．广东医学院衰老研究所／广东省医学分子诊断重点实验室，广东东莞 523808； 2．广东医学院生物化学与分子生物学研究所 ，广东湛江 524023) 摘 要 ：目的 初步研究DRE2基 因在抗肿瘤药物衣霉素诱导的内质 网应激 中的作用机制。方法 以质粒 pRS306为模板 ， 通过 PCR扩增含有 URA3开放 阅读框 的DRE2基 因破坏元件 der2：：URA3，然后利用基 因重组原理，构建 DRE2基 因杂合缺失 酵母菌株 ，并进一步检测其对衣霉素的抗性和复制寿命 。结果 相对于野生型茵株 ，DRE2基 因杂合缺失酵母菌株对衣霉素的抗 性增高，复制寿命缩短 (PO．05)。结论 DRE2基 因可能参与了酵母 内质网应激和衰老的调控。 关键词 ：DRE2；酵母 ；内质 网应激 中图分类号：Q255 文献标识码 ：A 文章编号：1671—8348(2014)31—4172-03 TheroleofsaccharomycescerevisiaeDRE2in endoplasmicreticulum stressresponse ZhaoWei，NiuYuJie ，YuanYuan ，LiuXinguang ’。 (1．InstituteofAgingResearch，GuangdongMedicalCollege~KeyLaboratoryforMedicalMolecular DiagnosticsofGuangdongProvince，Dongguan，Guangdong523808，China；2．Instituteof BiochemistryandMolecularBiology，GuangdongMedicalCollege，Zhanjiang，Guangdong524023，China) Abstract：Objective TostudytheroleofsaccharomycescerevisiaeDRE2inendoplasmicreticulumresponseinducedbytunica— mycin．Methods Theder2：：URA3genedeletioncassettewasamplifiedfrom thewildtypegenomicDNA byPCR；DRE2deficiency heterozygotestrainwasmadebygenerecombination．TheheterozygotestrainresistantabilitytOtunicamycinandthereplicativeli— fespanwereanalyzedinthisstudy．Results DRE2deficiencystrain wasresistanttOtunicamycin，butthereplicativelifespanwas decreasedcomparedtOwildtypestrain (P 0．05)．Conclusion DRE2maybeinvolvedintheyeastendoptasmicreticulum response andreplicativelifespanregulation． Keywords：DRE2；saccharomycescerevisiae；endoplasmicreticulum response DRE2从酵母到人类都很保守，它的蛋白结构 中含有铁硫 RRO2MA)购 自Takara公司 ；引物合成 、测序 由英骏生物科技 簇 ，因此被划分为铁硫蛋 白n]。铁硫蛋 白具有广泛 的生理功 有限公司完成；其他常规