四种结核菌培养基应用效果比较.docVIP

精品论文 参考文献 四种结核菌培养基应用效果比较 何大勇（辽宁省锦州市传染病医院检验科 辽宁锦州 121000） 【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）48-0383-02 【摘要】目的 对四种常用结核菌培养基进行实际效果对比，评价。方法 结核患者痰标本经前处理后，同时接种于四种常见结核菌培养基（包括匡铁吉琼脂培养基简称匡氏，丙酮酸钠细胞色素c培养基简称丙酮酸，改良罗氏培养基简称罗氏，小川辰次培养基简称小川）置37℃温箱内，每周观察2次，8周未生长按阴性判定。结果 213份痰标本匡氏分离出126例阳性标本，结核菌平均初生长时间为18.0d菌落偏大，杂菌抑制较好，总体情况明显好于罗氏和小川，与丙酮酸大致相当。结论 匡铁吉琼脂培养基相对简单易操作，结核菌生长快速菌落形成良好，有利于下一步的药敏实验。可作为分离鉴定结核菌的首选培养基。 【关键词】结核菌 培养基 分离 生长 比较 结核病是严重危害人类健康的传染病，在我国每年死于肺结核的人数超过死于其他传染病人数的总和，从病人标本中分离培养结核菌对于发现传染源，诊断结核病，判断化疗效果及流行病学上都有决定意义。特别是近年来多耐药结核菌株的增加以及肺结核外科治疗的开展，对培养结核菌的要求愈来愈迫切。迄今为止，针对结核菌的快速诊断研究如核酸扩增技术（PCR）具有速度快、特异性高等优点，但仍存在假阳性、死菌阳性和不能进行药敏的缺陷。而应用7H12培养基的Bactec460TB系统又因设备及试剂过于昂贵，难以推广和普及，因此涂片和培养技术作为基层实验室诊断的主要方法很可能还要维持多年。 我室制备了四种结核菌培养基，同时接种处理后的病人标本，进行对比观察，共213份住院肺结核病人痰标本，效果报告如下。 1 材料和方法 1.1培养基成分和制作方法 (1)匡铁吉琼脂培养基：购自解放军309医院中心实验室，主要成分：匡铁吉营养琼脂粉（DTN和DTI）,琼脂培养基础液（KBS），小牛血清。按说明书制作。(2)丙酮酸钠细胞色素c培养基：即小川培养基中用0.3%丙酮酸钠代替甘油，并加入2.5%葡萄糖及细胞色素c制成。(3)改良罗氏培养基：按常规制作，鸡卵必须新鲜。(4)小川辰次培养基：按常规制作，此培养基成本较低。 1.2痰标本的采集和前处理 病人停服抗结核药物48h后，用无菌痰盒留取晨痰，加3-5倍3%十二烷基磺酸钠倾入含十数粒玻璃珠具塞三角烧瓶内置康氏振荡器上振荡10min取0.2ml分别接种于上述培养基各2支。 1.3结果观察 于37℃温箱内培养，每周观察2次记录每份标本的初期生长日期和污染情况，8周未生长者按阴性判定。 2 实验结果 2.1阳性率，污染率，初期生长时间比较 见表1。 表1 213份痰标本分离培养结果（括号内为阳性数目） 2.2初期生长的分布 见表2。 表2 培养8周菌落初期生长分布 213份痰标本中，匡氏琼脂培养基培养阳性126例2周出现菌落占48.4%，3周为89.0%，5周达100%，丙酮酸钠则比其略晚，二者均大大领先于罗氏和小川，后二者2周出现菌落仅为26.0%和26.2%，3周为76.0和75.7%，8周达到100%。 3 讨论 本组实验表明匡铁吉琼脂培养基和丙酮酸钠细胞色素c培养基平均生长时间分别为18.0d和19.2d，二者相差不大杂菌抑制较好，阳性率较高，菌落偏大易于识别，与罗氏、小川相比差别显著（Plt;0.01）。罗氏和小川培养基是基层实验室通常采用的结核菌分离培养及药敏实验的培养基，因其高浓度的蛋白组分对药物的吸附作用，灭菌时药物活性的减弱和丧失使得其在培养、药敏实验时准确性抗污染性均较差。 匡铁吉琼脂培养基可提前一周报告培养结果，具有灵敏度高，结果准确，重复性好，简单易操作和廉价等优点，可作为一般防痨单位和各类医院使用。 参 考 文 献 [1]匡铁吉，宋萍，王得平等.微生物学报，1995，35(4)：298. [2]徐涛，王荣廷.临床检验基础.北京：人民出版社，1986，260. [3]张芳霞，马武祥.人民军医，2001，44（4）：237.