猪源新甲型H1N1流感病毒的分离鉴定及其对小鼠的致病性研究.pdfVIP

was the or BasicResearch Thisworksupportedby MajState 11CB505 DevelopmentProgram(973Program)(No．20003)，theImportant National 0004-0 ScienceTechnology 13， SpecificProjects(No．2008ZXl 10004-2 2009ZX14) 研究生：范群平 专业：预防兽医学 导师：高崧教授 刘秀梵教授 201 1年5月 “混合器”，不同来源的流感病毒在猪体内发生重排、突变的概率大大提高。因此， 猪被认为是新流感病毒产生的中间宿主。人类历史上的三次流感病毒世界大流行 感病毒H3N2大流行)后来证明都跟猪流感有关。因此对猪流感病毒的流行情况 进行监测具有重要的公共卫生意义。 2009年3月墨西哥新甲型流感病毒H1N1爆发，并迅速形成世界性大流行， 发病人群主要是学生以及青壮年人。后来的研究证明，此次大流行的新甲型H1N1 流感病毒是混合了禽源流感病毒、人源流感病毒和猪源流感病毒特征的重组病毒。 对猪群中猪源H1N1流感病毒进行流行病学监测对于防止重大疫情的发生，最大 程度降低经济损失，具有重要的意义。 为了解江苏省猪群中甲型H1N1流感的流行病学现状及其病原学特征，2010 个监测点的屠宰场、养殖场及发病猪群进行样品的采集与病毒分离，累计采集猪 鼻拭子1 型猪流感病毒。我们对其中的8株H1N1亚型的猪流感病毒进行了全基因测序和 遗传进化分析，发现8株猪源H1N1亚型流感病毒均为低致病性甲型流感病毒， 分离于无症状猪群，属于三重重组病毒，可能源于北美新毒株 ／㈣剃 蛋白中决定唾液酸(SA)受体结合类型的相关位点：225位有3个毒株由D突变为 蛋白8个潜在的糖基化位点中，也有2个毒株的第50位NQS氨基酸替换为NPS 使其潜在糖基化位点缺失，这些都可能是病毒在猪群中适应的结果，推测新甲型 H1N1流感病毒在猪体内经过一段时间适应后很有可能在我国猪群中成为新的优 势流行株。 为了对分离到的猪源甲型H1N1流感病毒的致病性有进一步的了解，随机选 取一株分离毒株：A／Swine／Jiangsu／48／2010，50 小鼠，并设接触组与对照组，以研究病毒的水平传播能力。接种后每天收集体重 数据，并在第3、7、11、14天捕杀小鼠，观察心、肝、脾、肺、肾、气管的组织 病理学变化，并进行病毒分离。结果表明：攻毒组小鼠与接触组小鼠体重早期有 不同程度的下降，后期逐渐恢复。攻毒小鼠出现了以肺损伤为主要特征的病理变 化，接种第3天、7天捕杀的小鼠分离出了病毒，第11天与14天捕杀的小鼠未 能分离出病毒。接触组小鼠也出现类似的病理变化，只是症状轻相对较轻，但是 接触组整个实验过程都没有分离到病毒，说明本次分离到的病毒可能可以在ICR 小鼠间传播，但是更多证据有待进一步研究。 关键词：猪流感病毒；H1N1亚型；基因组测序；进化；致病性 1NIswine influenza ts On