体外培养的人脐静脉内皮细胞在剪切力作用下分泌单核细胞趋化蛋白1的规律.pdfVIP

体外培养的人脐静脉内皮细胞在剪切力作用下 分泌单核细胞趋化蛋白一1的规律 于红梅，常晓年’曾衍钧 胡金麟2 (1.北京工业大学生物医学 程〔中心 北京 1000Y2) (2 中国人民解放军总医院徽循环研究室 北京 100853) 摘要 单核细胞趋化蛋白一1(MCP-1)能趋化单核细胞在内皮细胞下聚集，是动脉粥样硬 化最早期的病理改变之一。我们从生物力学的角度对体外培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)分泌MCP-1的规律作了研究。通过流动小室，给予HUVEC4,10,20句mlcm 的剪应力，利用免疫组化及酶联免疫吸附 (ELISA)法裁出不同时间点胞桨及灌流液中 MCP-l的含量，结果表明HUVEC合成及分泌MCP-1是随剪切力和时间变化而变化的。 低剪应力4dynlcm2会导致MCP-1分泌增加，并且剪应力作用2hr之后MCP-1分泌量上 升，5hr之后达到对照组的3倍，此后以较快速度下降，6hr后MCP-1含量接近静息水 平，即使持续给予剪切力，其分泌量不会增加。同时10dyn/CMr剪应力下MCP-1分泌 量变化小。该工作为进一步理解剪切力诱导动脉粥样硬化的发生提供实脸数据。 关镇词 剪切力，脐静脉内皮细胞CTI卫EC,单核细胞趋化蛋冬1(MCP-U，动脉 粥样硬化 动脉粥样硬化的发病机理是复杂的，是综 动脉粥样硬化早期病变之一是血液中单核 合性的较长过程，有关动脉粥样硬化机制有多 细胞在内皮细胞下聚集。吸引单核细胞聚集迁 种学说，一般认为是血管内皮细胞机能的变化 移的最重要的化学因子为 MCP-1z.MCP-1是 和损害引起内皮细胞的剥离，血浆成分 (脂质) 一种单核细胞特异性趋化因子，可产生于多种 的浸润，单核细胞的浸润，内膜内平滑肌细胞 细胞，在动脉粥样硬化的早期，主要产生于内 增殖，在这一系列反应过程中，动脉壁内皮损 皮细胞，.在单核细胞迁入内膜时起重要作用。 伤是动脉粥样硬化的始动因素。 正常动脉中极少细胞表达MCP-1.现已发现许 内皮细胞作为血液与血管的屏障，一生生 多化学因子可影响MCP-1的基因表达和蛋白分 活在血流环境中，血流及其产生的机械应力对 泌，如IL-14,TNF-a，“INF-Y,PDGF6,LDL,NO 内皮细胞可产生多方面的效应，同时内皮也可 等。S衍尹等于1999提出MCP-ImRNA的表达 通过自身的代谢对此产生适应性变化。适当应 受剪应力 (16dynlcm2)双相调控。此后有研究 力对于维持内皮形态，生长，更新和各方面功 表明MCP-1基因序列中有含佛波醉酌 (TPA) 能必不可少。但如果血流变化超过内皮的生理 的反应元件(TPR)lo，与其对应力的反应关系密 域值.就会损伤内皮细胞，引发一系列的病理 切。但有关剪切力影响MCP-1蛋白代谢的规 变化。动脉粥样硬化常发生于大血管分支或弯 律研究较少。 曲处。该处血流方式不同于血管其他部位，层 与以往的研究不同。我们观察剪应力为4. 流被破坏，管壁承受切应力低，血液为震荡流， 10,20dynlcm2下，不同时间内MCP-1的合成 这些差异及所造成内皮细胞力学性质的改变可 与分泌量，以剪应力为4dynlcm为低应力组， 能是动脉粥样硬化的重要病因’。但高剪应力与 通过免疫组化方法和数字图象处理方法分析 低剪应力的损伤作用依然尚未有定论。我们认 HUVEC细胞内MCP-1的合成量，通过ELISA 为血流速度过高或过低均可造成内皮细胞形态 分析灌流液中MCP-1的分泌量。低剪应力 和功能的改变，导致血管损伤。 4dynlcm会导致MCP-1分泌增加，并且剪切力 作用2hr之后MCP-1分泌量上升，5hr之后达 显微镜下细胞成铺路石样形态，2)L.因子相关 到对照组的3倍，此后以较快速度下降.6hr后 抗原检测阳性:取细胞载片，PBS冲洗，4%多 MCP-I含量接近静息水平， 即使持续给予剪 聚甲醛固定，依照试剂盒说明操作，DAB显色 切力，其分泌量不