血管内皮生长因子mRNA干扰提高胶质母细胞瘤U251细胞对放化疗敏感性的研究.pdfVIP

·718· ·实验研究· 血管内皮生长因子mRNA干扰提高胶质母 细胞瘤U251细胞对放化疗敏感性的研究 俞洋 宗祥云冯建国 吴斌 【摘要】 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)mRNA干扰对胶质母细胞瘤的治疗意义。方 法应用RNA干扰技术，对胶质母细胞瘤细胞株U251进行了VEGFmRNA干扰、辅以6Gy的放射 剂量照射、化疗处理。在干扰前后用流式细胞技术、噻唑蓝(MTr)比色法及倒置显微镜观察等技术 对U251细胞株的细胞周期、凋亡率、抑制率、细胞形态进行检测。结果胶质母细胞瘤‘U251细胞 在转染VEGF小干扰RNA(siRNA)后，逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)检测发现VEGFmRNA的表 达显著下降，均数下调大于60％；流式细胞技术显示，U251转染VEGFsiRNA后细胞出现G0一G，阻 滞，G2+M期细胞数目减少，转染细胞出现不同程度凋亡；MTr比色法可见，转染前不同浓度的紫杉 醇对U251细胞有一定的抑制，作用48h半数抑制剂量(IC∞)=28．1g／L。干扰后，紫杉醇在不同浓 度对U251细胞的抑制率都有大幅度的提高，IC∞=0．02S／L；集落形成抑制实验中，单药物组与单放