海七鳃鳗pma-miR-200c-3p对斑马鱼心脏发育的作用研究.PDFVIP

第31卷第5期 大 连 海 洋 大 学 学 报 Vol.31No.5 2016年10月 JOURNAL OF DALIAN OCEAN UNIVERSITY Oct . 20 16 DOI:10.16535/ ki.dlhyxb.2016.05.007 文章编号:2095-1388(2016)05-0510-06 海七鳃鳗pma-miR-200c-3p对斑马鱼 心脏发育的作用研究 1 1、2 1 1、2、3、4 刘云 , 王丛丛 , 郭亚南 , 许强华 (1郾 上海海洋大学海洋科学学院, 上海201306;2郾 大洋渔业资源可持续开发省部共建教育部重点实验室, 上海201306; 3郾 国家 远洋渔业工程技术研究中心, 上海201306;4郾 远洋渔业协同创新中心, 上海201306) 摘要:为研究海七鳃鳗Petromyzon marinus pma-miR-200c-3p在心脏发育过程中的生物学功能, 采用显微 注射技术, 将pma-miR-200c-3p模拟体注射到斑马鱼Danio rerio胚胎, 过表达pma-miR-200c-3p后, 使 用qRT-PCR及Western blot法检测了一些与心脏发育相关的标志性基因的表达水平, 以及BMP/ Smad通路 重要基因蛋白水平的变化, 并利用生物信息学预测、 GFP荧光表达分析了pma-miR-200c-3p 的生物学作 用。 结果表明: 过表达pma-miR-200c-3p 的斑马鱼胚胎中, 与心脏发育相关的标志性bmp4、 bmp5、 smad1、 gata5、 tbx2b和notch1a基因的表达水平极显著上调(P0郾01), 同时BMP/ Smad通路中BMP4、 Smad1、 GA鄄 TA5蛋白表达水平也明显升高; 细胞试验表明, cdx1b基因可能是pma-miR-200c-3p 的一个靶基因。 研究 表明, pma-miR-200c-3p可能通过抑制cdx1b基因的表达, 参与BMP/ Smad通路以促进心脏发育。 关键词:海七鳃鳗;miR-200c-3p; 斑马鱼; 心脏发育; cdx1b 中图分类号: Q951摇 摇 摇 摇 文献标志码: A 摇 摇 心脏作为胚胎发育过程中最早形成的器官之 导心外膜细胞的转移和分化。 此外, 近年来 mi鄄 一, 为其他器官的发育和生长提供氧气和营养, 并 croRNA对心脏发育的调节也受到广泛关注。 [1] 参与机体的生命活动 。 心脏的形成是一个复杂 microRNA是一类21~25nt相对保守的非编码 [11] 的动态过程, 首先, 心脏由形状、 大小一致的心肌 RNA , 在转录后水平上调控基因的表达。 mi鄄 细胞组装成线性管状结构, 接着线性管状结构发生 croRNA参与了不同的生命活动, 调控着众多基因 [2] 环化, 心肌细胞增大、 延伸、 细胞迁移 , 心室、 的表达。 至今已发现许多microRNA, 其对应的靶 [3] 心房膨大, 最终