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中国农业科学 2005,38(5):1034-1039 Scientia Agricultura Sinica 重组鸡白细胞介素2的诱导表达与生物学活性测定 1 2 1 1 1 1 2 2 陈吉刚 ，陈维虎 ，周继勇 ，王金勇 ，齐 静 ，郑肖娟 ，俞照正 ，孙红霞 1 2 （浙江大学动物预防医学研究所病毒与免疫研究室，杭州 310029 ； 浙江省象山县农林局，象山 315700 ） 摘要：将去除信号肽的鸡 IL-2 基因编码框克隆到原核表达载体 pBAD/His B，实现了重组鸡 IL-2(rchIL-2) 蛋白在大肠杆菌中的高效表达。SDS分析显示，表达蛋白的分子量约为 18 kD。用 rchIL-2 为抗原制备了单 克隆抗体和多克隆抗体，建立了检测rchIL-2含量的抗原捕获ELISA，探讨了天然chIL-2 蛋白的体外表达动力学。 非变性条件下纯化的 rchIL-2 (0.4 ng) 对 Con A 活化的鸡 T 淋巴细胞具有明显的增殖活性，而对鸭及鹅的 T 淋 巴细胞无增殖活性。抗 chIL-2 多克隆抗体可完全中和 rchIL-2 和天然 chIL-2 蛋白的生物学活性，而单克隆抗体 无中和rchIL-2和天然chIL-2蛋白生物学活性的功能。这些研究结果证实，大肠杆菌表达的rchIL-2及其多克隆 抗体拥有生物学功能，而获得的单克隆抗体不具有chIL-2的中和特性。 关键词：鸡；白细胞介素-2；生物学活性；单克隆抗体；多克隆抗体；抗原捕获ELISA In vitro Expression and Bioactivity of Chicken Interleukin-2 1 2 1 1 1 1 CHEN Ji-gang , CHEN Wei-hu , ZHOU Ji-yong , WANG Jin-yong , QI Jing , ZHENG Xiao-juan , 2 2 YU Zhao-zheng , SUN Hong-xia 1 ( Laboratory of Virology and Immunology, Institute of Preventive Veterinary Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310029; 2Xiangshan Bureau of Agriculture and Forestry of Zhejiang Province, Xiangshan 315700) Abstract ：In this study, the recombinant chicken interleukin-2 (rchIL-2) was successfully produced in the pBAD/His B expression system induced by L-(+)-arabinose. By SDSanalysis, the observed molecular weight of rchIL-2 fusion protein without the signal peptide was 18 kD. Monoclonal and polyclonal antibodies specific for rchIL-2 were produced. The