性病实验室检测方法..ppt

标本的采集和运送-运送 淋球菌的抵抗力弱，对热敏感，不耐干燥。取材后标本若不能立即接种于选择性培养基上时，需采用运送系统。置于非营养型运送培养基中的标本应在12小时内送到实验室，接种于选择性培养基，分离阳性率可达90%以上。超过24小时则分离阳性率下降。 直接显微镜检查 染色方法: 革兰染液 美兰染液 姬姆萨染液 荧光抗体 直接显微镜检查 原理：男性淋菌性尿道炎患者常有大量黄白色脓性分泌物，其多形核白细胞内可找到革兰染色阴性的双球菌。 方法：革兰染色为一传统方法，革兰染色将菌分为二大类，即染成紫色的革兰阳性菌及染成红色的革兰阴性菌。 革兰染色：细胞内革兰阴性双球菌 美兰染色 直接显微镜检查的临床意义 男性淋菌性尿道炎的尿道标本 敏感性及特异性可高达95%～99%，具诊断价值。 宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时 敏感性仅40～70%。 不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌感染。 亦不能用于疗后判愈。如果在多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性双球菌，需做培养进行确证。 淋球菌培养 1．原理：淋球菌在适宜的培养基上可生长出特征性的菌落，根据菌落大小、形态、光泽、边缘、颜色等情况，可以作为淋球菌的鉴定依据之一。 2、方法特点： 敏感性 81~100%。 特异性 100% 淋球菌培养 培养法为诊断淋病的金标准. 对女性淋病的确诊应做淋球菌培养 从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。 培养的敏感性81~100%。 培养的优点有： — 特异性极高（100%）； — 可发现无症状淋球菌感染患者； — 可确诊儿童性虐待； — 可用于进一步作药敏试验； — 可用于治疗后的判愈试验。 淋球菌培养-选择性培养基 评价培养基质量的一个重要指标: 男性淋菌性尿道炎标本的革兰染色与培养的符合率应达95%～100%。如果革兰染色阳性/培养阴性的比率较高则表明选择性培养基的质量欠佳 淋球菌培养-接种标本 取材后标本应尽可能及早接种。培养基应先置于室温中预温。将取材的拭子转动涂布于平皿的上1/4范围，然后用接种环分区划线，以保证获得较纯的单个菌落。 接种标本-四区划分接种 淋球菌培养-培养条件 淋球菌培养-观察结果 培养24小时后检查平皿，此时没有菌生长的平皿应继续培养至48小时，仍无菌生长才可丢弃，作出淋球菌培养阴性的报告。 对选择性培养基上分离的直径在0.5～1mm，无色、灰白色的半透明菌落应作进一步鉴定。 淋球菌培养-观察结果 淋球菌氧化酶阳性 淋球菌培养-淋球菌的确证试验 糖发酵试验 免疫学试验 -荧光抗体染色 -协同凝集试验 酶底物试验 DNA探针试验 糖发酵试验 糖发酵试验检测奈瑟球菌分解特定糖类(葡萄糖、麦芽糖、乳糖及蔗糖)产酸的能力。根据淋球菌仅分解葡萄糖，脑膜炎球菌分解葡萄糖和麦芽糖，乳屑奈瑟球菌分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖或不分解这些糖类，可将淋球菌与可能在淋球菌选择性培养基上分离出的其他奈瑟球菌加以鉴别。 糖发酵试验-奈瑟球菌属的糖发酵特征 细菌 葡萄糖 麦芽糖 乳糖 蔗糖 淋球菌 + - - - 脑膜炎球菌 + + - - 乳酰胺奈瑟菌 + + + - 灰色奈瑟球菌 - - - - 布兰汉卡他球菌 - - - - 淋球菌的鉴定特征 菌落形态 淋球菌样 革兰染色 革兰阴性双球菌 氧化酶试验 阳性 过氧化物酶试验 阳性 快速糖发酵试验 G+ L- M- S- β-内酰胺酶 阳性﹙PPNG﹚或阴性 淋球菌培养的临床意义 * * 性病的实验室诊断 性病实验室诊断技术 性病是一组主要通过性接触而传播的一种传染性疾病。 包括细菌、真菌、病毒、衣原体、支原体、螺旋体、原虫和寄生虫等 性病实验室诊断 为临床正确诊断提供科学依据 * 病原体 淋球菌 梅毒螺旋体 生殖器疱疹病毒 生殖道沙眼衣原体 乳头瘤病毒 HIV病毒 杜克雷噬血杆菌 衣原体 念珠菌 滴虫 疥虫 阴虱 肝炎病毒 －－－ 病 种 淋病 梅毒: 生殖器疱疹: 生殖道沙眼衣原体感染: 尖锐湿疣: HIV感染/艾滋病: 软下疳: 性病性淋巴肉芽肿: 念珠菌性阴道炎: 滴虫性阴道病: 疥疮: 阴虱病: 肝炎（乙、丙）： －－－ 性传播疾病(STD)/性传播感染(STI) 主要常见性病实验室检测介绍 梅毒 淋病 常用梅毒检测方法 病原学检测 血清学检测 病原学检查 原理：一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而