溴米钠普鲁卡因注射液细菌内毒素检查法的建立.docVIP

精品论文 参考文献 溴米钠普鲁卡因注射液细菌内毒素检查法的建立 吴启北1 王巍2 刘新兰3 （1明光市人民医院 安徵滁州 239000； 2滁州市食品药品检验所 安徵滁州 239000） （3南京生命能科技有限公司 江苏南京 210000） 【摘要】目的 建立溴米钠普鲁卡因注射液细菌内毒素检查法。方法 用不同厂家生产的鲎试剂对溴米钠普鲁卡因注射液进行干扰试验，以确定其最大不干扰浓度。结果 试验表明溴米钠普鲁卡因注射液稀释120倍可消除干扰，确定其细菌内毒素限值为20EUbull;mg-1。结论 所建方法可用于溴米钠普鲁卡因注射液中内毒素的检查。 【关键词】溴米钠普鲁卡因注射液 鲎试剂 细菌内毒素检查法 【中图分类号】R927 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）27-0357-02 溴米钠普鲁卡因注射液是由溴米钠、盐酸普鲁卡因、苯酚组成的复方注射液，具有镇静催眠、镇吐等作用。临床上主要用于治疗神经性呕吐和妊娠呕吐，也用于晕车、胃痉挛等呕吐的症状。该品种执行标准无热原检查项。本文参照《中国药典》2010年版二部附录XIE细菌内毒素检查法[1]对溴米钠普鲁卡因注射液注射液的细菌内毒素检查法[2]的可行性进行探讨，建立溴米钠普鲁卡因注射液中细菌内毒素的检查方法。 1 实验材料 细菌内毒素检查用水（福州新北生化工业有限公司，批每支5 ml）；细菌内毒素工作标准品（中国药品生物制品检定所，批号2007-4，每支150 EU）；鲎试剂（广东湛江海洋生物制品厂，批号110312 lambda;=0.25 EUbull;ml-1）；鲎试剂（福州新北生化工业有限公司，批号lambda;=0.25EUbull;ml-1）；细菌内毒素检查用具（180℃ 3h）；ZH-2型旋涡混合器；HH-W21-Cu600型电热恒温器；溴米钠普鲁卡因注射液（山东方明药业股份有限公司，规格2ml/3mg（按普鲁卡因计）批号1105119，1105227，1106221） 2 实验方法与结果 2.1 鲎试剂灵敏度复核 将细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，按《中国药典》2010年版二部附录XIE细菌内毒素检查法[1]进行灵敏度复核试验，结果见表1。两批鲎试剂lambda;c 均在0.5-2.0lambda;之间，表明两批鲎试剂的灵敏度均符合规定，可用于实验。 表1 鲎试剂灵敏度复核 2.2 细菌内毒素限值的确定[3] 细菌内毒素限值L=K/M，式中K为按规定的给药途径，成人每公斤体重每小时可以接受的最大细菌内毒素剂量（注射剂K=5 EUbull;kg-1bull;h-1）,M为成人每公斤体重每小时给药的最大剂量，以mgbull;kg-1bull;h-1表示。按说明书指导下用药，本品每小时最大注射量为10ml，规格为2ml/3mg（按普鲁卡因计），计算得出溴米钠普鲁卡因注射液的M=0.25mgbull;kg-1bull;h-1。因此确定L=K/M=5/0.25=20EUbull;mg-1。 2.3 最大有效稀释倍数（MVD）[3] 计算溴米钠普鲁卡因注射液的有效稀释倍数MVD，MVD=CL/lambda;,当lambda;为0.25Eubull;ml-1时，相应的MVD(lambda;=0.25)=120,用细菌内毒素检查用水把供试品稀释成以上各倍数，备用。 2.4 供试品干扰试验 用细菌内毒素检查用水和1:120稀释液将细菌内毒素工作标准品分别制成2.0、1.0、0.5、0.25lambda;的系列浓度，分别用上述两个厂家的lambda;=0.25 EUbull;ml-1的鲎试剂考察3批供试品在1:120稀释液浓度下的干扰情况，每一浓度做4管，同时做阴性对照。结果表明：3批供试品在1:120稀释液浓度下对试验无干扰作用。见表2。 表2 细菌内毒素干扰实验结果 2.5 供试品检查试验 取3批溴米钠普鲁卡因注射液，按《中国药典》2010年版二部附录XIE细菌内毒素检查法分别用两个厂家的鲎试剂考察其在1:120稀释液下内毒素限值，结果均符合中国药典对其有效性的规定。结果见表3。 表3 供试品细菌内毒素检查实验结果 3 讨论 实验过程中的干扰试验是必需的，其目的是了解样品的稀释倍数对