西南地区高山湖泊中可培养细菌多样性及其所产胞外活性-微生物学报.PDFVIP

微生物学通报 Sep. 20, 2017, 44(9): 2043−2054 Microbiology China /wswxtbcn tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.160852 研究报告 西南地区高山湖泊中可培养细菌多样性及其 所产胞外活性物质的特性 1 1 2 1 1 1 1 1 张姜 黄嘉丰 李艳玲 刘丹 吴日帮 廖斌强 雷鸣 肖潇 1 1* 武翠玲 何海伦 (1. 410013) (2. 210008) 摘 要：【目的】研究西南不同地区的高山湖泊中可培养细菌的多样性及其产胞外蛋白酶、纤维 素酶和胞外多糖的能力。【方法】以西南4 个不同地区的高山湖泊：雷波的马湖(LB)、中缅边境 的凯邦亚湖(ZM)、沙德的莲花湖(SD)、腾冲的青海湖(TC)的水样为研究对象，利用稀释涂布平板 方法对可培养细菌进行分离筛选，然后通过对可培养细菌的生理生化指标和16S rRNA 基因序列 进行分析，初步确定细菌属别；对分离得到的菌株进行产胞外蛋白酶和纤维素酶活性测定和产胞 外多糖能力检测。【结果】从西南地区4 个湖泊中共分离筛选得到41 株细菌，其中LB 15 株、 ZM 13 株、SD 7 株、TC 6 株。根据 16S rRNA 基因序列的系统进化分析，4 个地区可培养细菌 的组成和丰度存在明显差异，其中LB 和ZM 的优势菌属是芽孢杆菌属(Bacillus) ，其次是气单胞 菌属(Aeromonas)和假单胞菌属(Pseudomonas) ，分离的 TC 菌株全部属于芽孢杆菌属(Bacillus) ， 分离的 SD 菌株特异性较强。进一步酶活性和胞外多糖检测表明，分离得到的 41 株细菌中有 28 株菌的发酵产物具有蛋白酶活性，6 株具有纤维素酶活性，17 株可产胞外多糖 (ExopolysaccharidesEPS) 。其中有2 株细菌同时产蛋白酶、纤维素酶和胞外多糖，10 株细菌同 时产蛋白酶和胞外多糖，2 株细菌同时产蛋白酶和纤维素酶，1 株细菌同时产纤维素酶和胞外多 糖。【结论】西南4 个高山湖泊中存在丰富的微生物菌种资源，且4 个湖泊中筛选的可培养细菌 受所处环境的影响大。其中莲花湖由于高海拔和较偏僻等特点，人为干扰小，分离得到的细菌类 群与其他湖泊相比明显不同；而马湖、凯邦亚湖和青海湖3 个湖泊的海拔相对较低，受人类活动 影响较大，分离得到的细菌均较常见。此外高山湖泊中的可培养细菌具有分泌多种胞外活性物质 特性，为工业化应用奠定了资源基础，极具更深入的开发和研究价值。 关键词：高山湖泊，16S rRNA 基因，细菌多样性，蛋白酶，纤维素酶，胞外多糖 Foundation item: National Natural Science Foundation of China (No.; National Spark Program of China (No. 2013GA770009); Open Project of University Key Laboratory (No. 2015CNERC-CTHMP-07) *Corresponding author: Tel: 86-7318-2650230; E-mail: helenhe@ Received: November 23, 2016; Accepted: February 27, 2017; Published online () : March 16, 2017 基金项目：(No.