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单羧酸转运泵基因家族研究进展 　　单羧酸转运泵基因家族研究进展张桂芝x黄桂君郭先健（第三军医大学全军呼吸内科研究所，重庆400037）功能，包括胞内pH值调节及乳酸跨膜转运等。目前，已克隆出至少8个MCT亚型的cDNA，构成了哺乳动物细胞离子转运泵的一个新基因家族。各亚型具有底物和抑制剂的特异性以及组织学分布的差异性。因此，研究MCT的结构功能及调控机制，将可能为肿瘤等疾病诊治提供新的手段。 　　学科分类号Q78由于糖代谢酶谱的改变及其远大于毛细血管的生长速度，因此肿瘤细胞生长于相对缺氧的环境中，糖酵解是其获取能量的主要方式。而糖酵解产生大量乳酸、丙酮酸等酸性产物，造成细胞内酸化，抑制其生长。要获得较高的糖酵解率，必须将乳酸等转出细胞。而实验证明肿瘤细胞内pH值反而高于胞外；研究表明肿瘤细胞膜上除Na+/H+泵外，跨膜单羧酸转运泵（monocarboxylatetransporter，MCT）在细胞内外乳酸转运及H+调节方面也具有重要作用。至今，列。各亚型均可促进H+/乳酸的转运，各自又具有底物和抑制剂的特异性及不同的组织学分布。 　　目前虽证实了哺乳动物MCT1-MCT4质子偶联的乳酸和丙酮酸的转运，但仅对MCT1和MCT2作了底物和抑制剂动力学的详细分析。而MCT各亚型在组织中的表达、调控及其生理作用是当前的研究热点。 　　1MCT基因的结构与功能现已明确人类单羧酸转运泵家族的存在，并知道它至少有8个成员。已鉴定的人类MCT家族成员的跨膜域排列见。 　　已证明哺乳动物细胞中至少存在8种MCT相关序该序列为人类MCT丨序列生物化学与生物物理进展11MCT家族基因的共同特征拓扑学预测所有MCT家族成员有12个跨膜（ransmembraneTM）螺旋，包括胞内C端、N端和TM片段6~7之间的一个大的细胞内环。N、C端位于胞质（）。这已用蛋白质水解法和标记MCT1的研究证实。其他膜转运泵，如葡萄糖家族也有12个跨膜环结构与这些家族一样，MCT家族成员在TM跨膜区和其间较短的环区显示了最大的序列保守性。而亲水区（TM1前的N端、TM6、TM7之间的的大环区及TM12之后的C端）保守性极低。实际上，TMs6和TMs7之间的环区大小变化很大，对MCT5和MCT7，有105和93个残基，而MCT1、MCT3、MCT2、MCT6和MCT8分别为67、66、49、47和40个残基，MCT4只有29个残基。这种歧异的亲水区是TM12转运泵家族的共同特征GWVV，它横越首位进入TM1；另一个是FXKXAXAG序列，它引导TM5（括号外的黑体残基在序列中是恒定的，括号内的残基是可变化的氨基酸，正常状态的残基是共同氨基酸）。该分子的C端一半（TMs7~12）只有一个恒定残基显示了较低的保守性。TM11和每一侧的环区是这个区域的最高保守区，有一个缘。有证据表明MCT1的C端一半涉及底物的特异性。例如，中国仓鼠MCT1的TM10由苯丙氨酸变成半胱氨酸，MCT1则由一个乳酸/丙酮酸转运泵变成甲羟戊酸转运泵。而且，4，4-双-异硫氰酸二苯乙烯-2，2’-硫氰酸盐（DIDS）在MCT1中的结合位点（结合在底物结合位点处或其附近），就位于C端一半。 　　有一个能结合羧酸盐阴离子的正电荷集团是所有MCTs的一个特征。红细胞MCT1中的精氨酸可能发挥了此作用，因精氨酸反应物苯乙二醛可抑制MCT1的乳酸转运。TM8中的一个精氨酸残基（人类MCT1的Arg313）在高等真核生物所公认的MCTs（除MCT5以外）和几乎所有的S.cerevisiae和C.efegans序列中是保守的，研究证明该残基的点直接诱变极大地降低了MCT对乳酸的亲和力。序列中完全保守的另一精氨酸/赖氨酸残基，位于TMs4和TMs5之间的保守区内。 　　2晡乳动物MCTs的组织分布与生理作用MCT异构体的重要生理意义与其独特性质及调控有关。目前，RNA印迹分析已确定MCT异构体的mRNA在人类很多组织中表达。Lin等对MCT1和MCT2也作了类似研究。现已有大鼠、小鼠和仓鼠组织MCT1和MCT2的报道，对MCT3，只有鸡组织的相关数据。各研究表明，8个MCT异构体mRNA的表达均有特定的组织依赖性。MCT1几乎存在于所有组织，尤其集中于心脏和红肌纤维，表明与乳酸氧化有关。而MCT2只在少量组织与MCT1―起表达，且二者在组织内的确切定位不同，表明各有独特的功能；并且其氨基酸序列和组织分布有物种差舁10.MCT2的底物亲和力是MCT1和MCT4的10倍，主要存在于底物浓度较低的细胞中，如肾小管、神经细胞和精子尾部。MCT3仅在鸡和大鼠的视网膜色素上皮细胞（RPE）中表达，其蛋白质定位在RPE的基底膜，而MCT1在RPE尖端表面。MCT4常出现于高酵解的细胞中，如白肌纤维、白细胞和肿瘤细胞，可见其表达与乳