专业分析第一章 绪论 PPT.ppt

专业分析;;第一章 绪论;1.1 课程性质、内容、目的和要求;生物工程：对象、运用技术平台、产品 对象：微生物、植物、动物细胞 技术平台：生长（试管、摇瓶、罐）、代谢（生化途径及基质消耗、中间产物的生成检测）、达到产品合成（最优化及检测） 专业分析是生物工程基础之一 ;要求： （1）掌握生物工程样品分析的基本知识，熟悉各种基本概念、名词和术语，并正确理解它们的意义及应用范围； （2）掌握样品的采集、制备、处理与保存的一般方法； （3）掌握生物工程样品主要成分的分析原理和基本操作技术； （4）通过实验了解分析的方法、操作技术、仪器设备的使用方法。 （5）培养正确观察、记录实验现象和处理数据，正确运算和表达结果并能写出正确的实验报告，从而进一步提高生产和科学研究中分析和解决问题的能力。 ;专业分析对象;常用的分析方法;化学分析法;仪器分析法;物理化学分析法包括: ? 光学分析法： 紫外可见光分光光度法芳香化合物、蛋白质、核酸 原子吸收分光光度法 大部分元素 荧光分析法 维生素 红外光谱法 氨基酸 ? 电化学分析法 电位分析（pH分析、离子选择性电极分析）、电导分析（溶液中的离子浓度：水的纯度 糖品灰分），电容量分析（如电位滴定) ? 色谱分析法 薄层色谱 有机酸 黄曲霉素 气相色谱 小分子的氨基酸、脂肪酸 高效液相 维生素 糖类 农药残留 质谱分析和色－质联用分析 ;酶分析法;分析的一般程序;1.2 样品采集、处理与保存; 需遵守的原则：代表性、采用方法与目的的一致性、原有理化指标的完整性。 代表性：反应生化过程各个时期的特点，即周期取样 采样与目的一致：如非生物活性材料取样（发酵上清、生物量、pH等）取样后可以一般冻存；而活性材料（如检测酶活性）需要保持细胞在取样时的代谢状态，因此需要液氮保存。 原有理化指标一致性：也即是保持细胞在取样时的代谢状态，取样后未合适保存，微生物代谢状态发生变化，此样非彼样。;采样方法 随机抽样及其特点：随机原则，可避免人为倾向性 代表性取样及其特点：时间空间变化规律、代表性 通常采用两种方法结合的方式;二、样品保存;三、样品的预处理;（一）有机物破坏法;2、湿法消化 简称消化法;（二）溶剂提取法 ? 利用各组分在某一溶剂中溶解度的差异，将各组分分离的方法，又称溶剂萃取法。常用于测定维生素,重金属,农药残留,黄曲霉毒素 1、 溶剂的选择 ? 根据:相似相溶”原则,选择溶剂 极性弱成分(有机氯农药) → 极性小的溶剂(正乙烷,石油醚) 极性强成分(黄曲霉毒素B1) →极性大溶剂(甲醇,乙醇,水) ? 溶剂沸点 45 -- 80℃ 为宜，利于挥发和浓缩 ? 溶剂惰性,不与样品发生反应 ;2、提取方法 提取方法可归纳为三种：浸提法、溶剂分层法、 （1）浸提法 ：将(固体如离心后的湿菌体)样品放入溶剂中浸泡,使被测组分溶于溶剂中,分为震荡法和捣碎法。前者为将样品切碎用溶剂浸泡，回收率较低；后者将样品与溶剂用捣碎机共同捣碎一段时间的方法，回收率高，但杂质也高;（四）色层分离法 ? 色层分离法又称色谱分离法。根据原理不同,可分为: 吸附色谱分离、分配色谱分离、离子交换色谱分离 1、吸附色谱分离 ? 用吸附剂选择性的吸附被测成分或干扰成分，常用吸附剂有硅藻土、硅胶、氧化铝、聚酰胺，如 聚酰胺吸附色素 2、分配色谱分离 ? 根据不同物质在固定相和流动相间的分配比不同而进行分离的方法，如多糖类物质的酸水解后的纸层析，定性检测和分离 3、离子交换色谱分离 ? 利用离子交换剂与溶剂中离子间所发生的交换反应来进行的分离方法;（五）化学分离法 1、沉淀分离法 ? 利用沉淀反应进行分离的方法。在试样中加入沉淀剂,使被测组分或干扰成分沉淀下来,经过滤或离心分离。 ? 例如,测纯蛋白,可加入重金属,使蛋白质下降,再测其沉淀的氮量，或者加入的重金属使蛋白质沉淀，使待测物质留在溶液中。 2、掩蔽法 ? 利用掩蔽剂与干扰成分作用,使干扰成分转变为不干扰测定状态。利用这种方法,可不经分离干扰成分，,简化了分析步骤。 如Cu 2＋ Cd 2＋等离子对铅的测定有干扰，可采用加入氰化钾和柠檬酸铵掩蔽。 ;1.3 分析方法的选择; 选择正确的分析方法是保证分析准确的关键环节 一、选择方法应考虑的因素： 分析要求的准确度和精密度 分析方法的繁简和速度 样品特性如形态、含量及干扰物的影响程度 现有条件 如长链脂肪酸和挥发性脂肪酸的检测 评价一个分析方法时，常用精密