细胞骨架组分的荧光染色观察.docxVIP

细胞生物学实验报告细胞骨架组分的荧光染色观察姓名： 学号： 班级：专业： 同组成员：一、实验原理鬼笔环肽(phalloidin) 是从一种毒性菇类中分离的剧毒生物碱，它同细胞松弛素的作用相反, 只与聚合的微丝结合, 而不与肌动蛋白单体分子结合。它同聚合的微丝结合后, 抑制了微丝的解体, 因而破坏了微丝的聚合和解聚的动态平衡。由于鬼笔环肽非常特异地结合并稳定聚合态肌动蛋白,因而对肌动蛋白的动态平衡造成严重影响. 此外, 较高浓度的鬼笔环肽对细胞有毒害作用。因此,用鬼笔环肽标记微丝并不是用于研究活体细胞的理想方法。二、实验目的1．掌握细胞骨架的显示方法2.掌握荧光显微镜的使用方法3.了解荧光显微镜下细胞骨架的基本形态结构三、实验器材1.材料： CHO（中国仓鼠卵巢细胞）、鸡胚成纤维细胞2.试剂： PEM：50mM pipes (pH6.9), 5mM EGTA, 5mM MgSO4, 0.225M 山梨醇 0.5% Triton X-100溶于PEM缓冲液。4%多聚甲醛溶于PEM缓冲液。 3.仪 器超净工作台、CO2培养箱、荧光显微镜4.其它用品：盖玻片（无菌）、35mm细胞培养皿、试管、移液管，滴管，酒精灯、75％酒精棉球、废液缸。四、方法