固液分离 第02章 预处理技术及初步分离 生物分离工程ppt.pptVIP

随着过滤介质的不断改进，采用膜介质的错流过滤法在生物分离中的应用越来越广泛。对于生成可压缩滤饼料液的过滤，可采用微过滤或超滤来提高滤速， 可实现几乎无滤饼生成的过滤分离过程。 循环式切向流过滤 1—贮罐 2—悬浮液进料 3—泵 4—滤液 5—膜滤器 6—浓缩液 7—阀门 8—浓缩液循环 2.2.3 离心分离 离心力场所产生的离心力可以比重力高几千至几十万倍， 悬浮液中固体微粒太细而难于过滤分离时，可应用离心分离方法。 生物研究和生物工业中，离心沉降是广泛使用的非均相分离手段，不仅适用于菌体和细胞的分离回收、结晶分离，而且可用于血球、胞内细胞器、病毒及蛋白质等分离，还适用于液液体系分离。 离心分离过程可分为离心过滤、离心沉降和离心分离3类。 过滤式离心机： 转鼓壁上开有小孔，上有过滤介质，用于处理悬浮固体颗粒较大、固体含量较高场合； 沉降式离心机：用于悬浮固体浓度较低的固液分离； 离心分离机：用于分离两种互不相溶的、密度差微小的乳浊液或含微量固体微粒的乳浊液。 离心力场中悬浮粒子受到的离心惯性力为 其中r为离心半径，即旋转轴心到沉降颗粒距离，ω为旋转角速度，N为离心机转速。上两式合并得到 离心机的分离因素，是指悬浮粒子在离心力场中受到的离心惯性力与其受到的重力之比；分离因素是衡量离心程度的重要参数，用Z表示。 2.2.3.1 离心分离原理 离心力常用Zg（如5000g, 10000g等）形式表达。 (2-29) (2-30) (2-31) (2-32) 层流状态下，悬浮液中固体粒子重力沉降速度为： 离心力场中，悬浮固体粒子层流状态下沉降速度为 悬浮固体粒子沉降速度还可表示为 式中，S为沉降系数(sedimentation coefficient)，一般用Svedbergs单位S表示，1S＝10－13s。 (2-33) (2-13) (2-34) S是溶剂物性的函数。溶剂物性已知时，可以换算成20℃水中的沉降系数Sw,20 式中，v为颗粒的比体积；ρw,20和ρL,T分别表示20℃水和T ℃的溶剂的密度； μw,20和μ L,T分别表示20℃水和T ℃的溶剂的粘度。 Sw,20也不是常数，而是颗粒浓度c的函数，按经验关系表示为 为 c→0时沉降系数(20℃,水中)；k为常数。 (2-35) (2-36) 蛋白质的沉降系数 相对分子质量较大的蛋白质，沉降系数也大。 根据 积分 已知颗粒沉降系数和比体积，利用溶剂物性值，可计算离心沉降速度。 (2-37) 可得管式离心机中颗粒完全沉降所需时间 (1)差速离心分级 差速离心是生化工业中常用离心分离方法。以菌体细胞的收集或除去为目的的固液离心分离，是分级离心操作的一种特殊情况，即为一级分级分离。 2.2.3.2 离心分离法 主要菌体和细胞的离心分离 细胞破碎液的差速离心分级 根据实际物系的特点(目标产物和其他组分的性质和相互作用等)、分离的目的和所需分离的程度，选择适当的操作条件(离心转数和时间)，可使料液中的不同组分得到分级分离。 (2)区带离心 生化研究中重要分离手段；根据离心操作条件不同，又分差速区带离心和平衡区带离心。 两种区带离心法均事先在离心管中用某种低分子溶质(如蔗糖溶液)调配好密度梯度，在密度梯度之上加待处理的料液后进行离心操作。 差速区带离心 ––— 密度梯度中最大密度小于待分离的目标产物的密度，离心操作中料液中各个组分在密度梯度中以不同的速度沉降，根据各个组分沉降系数的差别，形成各自的区带。一定时间后，从离心管中分别汲取不同区带，即得纯化的各组分。 平衡区带离心 ––— 密度梯度比差速区带离心中大，离心操作使料液中高分子溶质在与其自身密度相等的溶剂密度处形成稳定区带，区带中溶质浓度以该密度为中心，呈高斯分布。 区带离心法可用于蛋白质、核酸等生物大分子的分离纯化，但处理量小，一般仅限于实验室水平。 离心机是生化实验室及生化工业广泛使用的分离设备。实验室用离心机以离心管式转子离心机为主，离心操作为间歇式。 2.2.3.3 离心机 工业离心设备一般要有较大的处理能力，并能连续操作。离心分离设备根据其离心力(转数)的大小，可分为低速离心机、高速离心机和超离心机。 可在低温下操作的冷却式生化用离心机，称为冷冻离心机。 各种形式的离心机转子 离心机的种类和适用范围 工业离心分离设备中，较为常用的有管式和碟片式两大类。 * * 第02章 预处理技术及初步分离 2.2 固液分