高效液相色谱法测定不同产地当归中阿魏酸的含量.docVIP

精品论文 参考文献 高效液相色谱法测定不同产地当归中阿魏酸的含量 湘潭市中心医院 湖南湘潭 411100 【摘 要】目的：建立高效液相法，测定不同产地当归中阿魏酸的含量，分析产地对当归质量的影响。方法：采用高效液相色谱法对不同产地当归中的阿魏酸含量进行测定，Agilent Exlent C18柱作为规固定相（4.6mmtimes;250mm，5mu;m）；流动相为乙腈-0.085%磷酸溶液，比例为17：83；检测波长选择316mm；柱温设置为35℃；流速1.0ml/min。结果：当归药材中阿魏酸在浓度范围0.00612~0.2967g/L与峰面积具有良好的线性关系，r=0.9994。回收率平均为99.23%，RSD=2.17%。结论：采用高效液相色谱法（HPLC）用于不同产地当归中阿魏酸含量的测定，具有快捷、简便、准确和灵敏的优势，可对当归质量控制提供参考。 【关键词】高效液相法；阿魏酸 当归是一种较为常用的中药材，具有活血、补血、调经、润燥和止痛等功效，2015年版《中华人民共和国药典》规定其唯一药材来源于伞形科植物当归的干燥根[1]。临床上对当归的应用较为广泛，需求量不断增加，价格也出现了持续增高的现象，但因产地的气候、管理等影响，使得当归质量有较大差异[2-3]。基于此，本研究参考相关文献，采用高效液相法对四川，陕西，云南，吉林，贵州等产地当归中的阿魏酸含量进行了测定，借以为更好的控制药物质量提供依据。 1仪器与试剂 1.1仪器 高效液相色谱仪，型号选用Agilent-1100型，以及配套仪器，生产厂家：安捷伦科技有限公司；紫外光谱检测器（Agilent-1200型）；Agilent Exlent C18柱作为规固定相：4.6mmtimes;250mm，5mu;m；电子分析天平（精确到0.0001）；TU-1900紫外可见分光光度计；超声波清洗器。 1.2试剂 甲醇（色谱纯），水为超纯水，乙腈（色谱纯），其他试剂均为分析纯。阿魏酸对照品生产批号为201309，购自中国药品生物制品检定所；当归药材购自当地中药市场，经鉴定均确定为当归。 2结果与方法 2.1色谱条件选择 采用高效液相色谱法对不同产地当归药材中的阿魏酸含量进行测定，固定相：Agilent Exlent C18柱（4.6mmtimes;250mm，5mu;m）；流动相：乙腈-0.085%磷酸溶液，比例为17：83；柱温设置为35℃；检测波长设置为316mm；流速1.0ml/min；进样量10.0mu;l。理论塔板数按阿魏酸峰值计算ge;5000计。 2.2对照品溶液配制 精确称取阿魏酸对照品0.10mg，将其加入到5ml棕色容量瓶中，然后加入70%甲醇溶液定容，溶液备用。 2.3供试样品溶液配制 将不同产地当归药材研磨成粉末后，采用电子天平称取当归粉末2.0g左右，然后进行精密秤定并记录准确重量；然后将其分别置入具塞锥形瓶，准确加入20ml体积分数为70%甲醇溶液，密塞后秤定其重量，并加热回流，30min后取出，放置冷却后再次进行重量秤定，并用70%甲醇溶液补足减少的重量，充分摇匀后静置，取上清液进行过滤得到供试样品溶液。 2.4线性关系分析 精密吸取不同体积阿魏酸对照品溶液置入10ml容量瓶，吸取体积分别为100mu;l、200mu;l、500mu;l、1.0ml、2.0ml和5.0ml，然后加入70%甲醇溶液定容[4]。分别精密吸取10mu;l上述各浓度对照品溶液注入到高效液相色谱仪中，分别记录各自峰面积，以峰面积（y）与浓度（x）作标准曲线，，并进行回归分析获得回归方程y=3.1962x-5.0112，r=0.9994。并且阿魏酸在浓度范围0.00612~0.2967g/L与峰面积具有良好的线性关系。 2.5精密度分析 吸取供试样品溶液10.0mu;l，重复5次进样，测定其峰面积平均值，测得RSD=1.63%。结果表明，2.1中建立的测定方法具有良好的精密度，可满足测定要求。 2.6重复性分析 取5份同一批号的样品，根据“2.3供试样品配制”方法制备样品溶液，同时测定其中的阿魏酸含量，根据2.1中建立的测定方法测定阿魏酸峰面积，经结果计算，RSD=1.77%，具有良好的重复性。 2.7稳定性分析 精密吸取10mu;l供试样品溶液，分别于0小时、2小时、4小时、6小时、8