2015年暑期生物化学奥赛理论培训96.pptVIP

主要是蛋白质，极少数是RNA（核酶）。 酶的化学本质 * 核酶实例 核糖体 核糖核酸酶P 某些类病毒 第一类和第二类内含子 某些snRNA HDV 某些核开关 * 只能催化热力学允许的反应 反应完成后本身不被消耗或变化，即可以重复使用 对正反应和逆反应的催化作用相同 不改变平衡常数，只加快到达平衡的速度或缩短到达平衡的时间。 酶与非酶催化剂的共同性质 * 高效性 酶在活性中心与底物结合 专一性 反应条件温和 对反应条件敏感，容易失活 受到调控 许多酶的活性还需要辅助因子的存在，作为辅助因子的多为维生素或其衍生物。 酶特有的催化性质 * 酶的活性中心也称为活性部位，是指酶分子上直接与底物结合，并与催化作用直接相关的区域。 活性中心由结合基团和催化基团组成。前者负责与底物结合，决定酶的专一性，后者参与催化，负责底物旧键的断裂和产物新键的形成，决定酶的催化能力。但也可能有某些基团两者兼而有之。 酶的活性中心与酶促反应的专一性 * 属于单纯蛋白质的酶为单纯酶，属于缀合蛋白质的酶为缀合酶或结合酶。 缀合酶除了蛋白质以外，还结合某些对热稳定的非蛋白质小分子或金属离子，它们统称为辅助因子。丧失辅助因子的酶被称为脱辅酶，与辅助因子结合在一起的酶被称为全酶。 辅助因子包括辅酶、辅基和金属离子三类。辅酶专指那些与脱辅酶结合松散、使用透析的方法就容易去除的有机小分子。辅基专指那些与脱辅酶结合紧密、使用透析或超滤的方法难以去除的有机小分子。 单纯酶VS缀合酶 * 影响酶促反应速率的主要因素包括：酶浓度、底物浓度、反应温度、反应介质的pH和离子强度以及有无抑制剂的存在等。 最重要的因素：酶浓度和底物浓度 影响酶促反应的因素 * 米氏方程推导设定的3个条件： 反应速率为初速率，因为此时反应速率与酶浓度呈正比关系，避免了反应产物以及其他因素的干扰 酶底物复合物处于稳态即ES浓度不发生变化 符合质量作用定律 米氏方程 米氏反应动力学 * 1. 解读米氏常数Km Km是酶反应初速率为Vmax一半时底物的浓度。在一定条件下，可以使用它来表示酶与底物的亲和力。一个酶的Km越大，意味着该酶与底物的亲和力越低；反之，Km越小，该酶与底物的亲和力越高。 Km可以帮助判断体内一个可逆反应进行的方向。如果酶对底物的Km值小于对产物的Km值，则反应有利于正反应。否则，有利于逆反应。 2. 解读Vmax Vmax也是酶的特征常数，但随着酶浓度的变化而变化。 3. 解读kcat kcat称为酶的催化常数或转换数或周转数，具体是指在单位时间内，一个酶分子将底物转变成产物的分子总数。kcat的单位是s-1。如果一个酶遵守米氏方程，则kcat＝k2＝Vmax/Et。 4. 解读kcat/Km kcat/Km通常被用来衡量酶的催化效率,还可以反映一个酶的完美程度。大的kcat和（或）小的Km将给出大的kcat/Km值。 解读米氏方程 * 酶抑制剂的类型 可逆性抑制剂。以次级键与酶可逆结合，使用透析或超滤就可去除它们，让酶恢复活性； 不可逆性抑制剂。也被称为酶灭活剂，以强的化学键（通常是共价键）与酶不可逆结合，可导致酶有效浓度的降低，因此一旦失活就不可逆转。如果想恢复酶的活性，唯一的手段只能是补充新酶。 酶抑制剂对米氏酶动力学性质的影响 酶抑制剂作用的动力学 * 几种常见的酶抑制剂药物 * 可分为竞争性、非竞争性和反竞争性抑制剂。 竞争性抑制剂 性质：有两类，一类与底物在结构和化学上具有很强的相似 性；第二类与底物无结构和化学性质的相似性。 动力学： Km值提高，但Vmax不变。 非竞争性抑制剂 性质：既能与ES结合，又能与游离的酶结合。而一旦它们与E结合，将导致酶活性受到抑制。 动力学：Km不变,Vmax降低。 反竞争性抑制剂 性质：只能与ES结合，但不能与游离的酶结合。一旦它们与ES结合，将导致与活性中心结合的底物不再能够转变为产物。 动力学： Km降低,Vmax降低。 可逆性抑制剂 * 不合适的表达或激活导致细胞的癌变或死亡！ 酶需要在正确的时间和正确的地点有活性 * 别构调节的原理在于一些酶除了活性中心以外，还含有别构中心，该中心能够结合一些特殊的配体分子（有时为底物）。当别构中心结合配体以后，酶构象发生改变，从而影响到活性中心与底物的亲和力，并最终导致酶活性发生变化。 能够进行别构调节的酶称为别构酶，与别构中心结合调节酶活性的配体分子称为别构效应物。起抑制作用的别构效应物称为别构抑制剂，起激活作用的别构效应物称为别构激活剂。由底物作为别构效应物产生的别构效应称为同促效应，否则，就称为异促效应。许多别构酶具有多个别构中心，能够与不同的别构效应物结合。 别构调节 * 是指酶活性因其分子内的某些氨基酸残基发