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CRISPR-Cas9系统基因修饰理论与实战;1 基因表达研究方法;1 基因修饰的方法与各自优势;;*;*;1 CRISPR-Cas概述;1 CRISPR-Cas概述;CRISPR-Cas主要由两部分组成:;1.1 CRISPR结构;1.1 CRISPR结构;1.2 Cas家族;2 CRISPR-Cas系统的发现;2 CRISPR-Cas系统的发现;2 CRISPR-Cas系统的发现;2 CRISPR-Cas系统的发现;2 CRISPR-Cas系统靶向要求;2 CRISPR-Cas系统靶向要求;2 CRISPR-Cas系统靶向要求;3 CRISPR-Cas系统介导基因修饰;3.1 dual-RNA:Cas介导编辑模板替换;3.1 dual-RNA:Cas介导编辑模板替换;3.2 sg-RNA:Cas介导基因修饰;3.2 sg-RNA:Cas介导基因修饰;3.2 sg-RNA:Cas介导基因修饰;3.2 sg-RNA:Cas介导基因修饰; 2013年2月15日在《science》上发表的《Multiplex Genome Engineering Using CRISPR/Cas Systems》一文中,作者利用一个包含两个靶向不同基因的spacers的crRNA实现了同时对两个基因进行编辑。;3.3 cr-RNA:Cas介导双基因修饰 ;4 CRISPR-Cas系统前景分析;4 CRISPR-Cas系统前景分析;4 CRISPR-Cas系统前景分析;4 CRISPR-Cas;5 我们的工作
利用CRISPR-Cas9载体肿瘤基因M在卵巢癌细胞HeLa的编辑与敲除;母克隆8-31-M测序;5 我们的结果
成功获得了M基因敲除的HeLa细胞系,;5 我们的结果
验证肿瘤增殖、迁移等功能受到影响;
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