2010漓院pcr教材教学课件.pptVIP

1.以细胞为基础的载体法;;P161;1.PCR反应的过程：;2.PCR反应体系：; 1. 模板 / template DNA;微生物多样性分析（土壤、水体） 病原微生物检测（H1N1病毒） 食品中是否含转基因成分 DNA亲子鉴定 古生物标本（Jurassic Park）;2. 引物/ Primers;微生物多样性分析（16s rDNA） 病原微生物检测（H1N1病毒H基因） 食品中是否含转基因成分（针对其中的转基因植物成分） 动物生物多样性（mtDNA中的Cytb、COI、COII） 食品中病原体检测（沙门氏菌、LM等）;三、PCR扩增产物的分析 　　 PCR产物是否为特异性扩增 ，其结果是否准确可靠，必须对其进行严格的分析与鉴定，才能得出正确的结论。PCR产物的分析，可依据研究对象和目的不同而采用不同的分析方法。; 1. 凝胶电泳分析 琼脂糖凝胶电泳 (图.) 聚丙烯酰胺凝胶电泳 2. 分子杂交 是检测PCR产物特异性的有力证据，也是检测PCR产物碱基突变的有效方法。 3. 序列分析;四、PCR 延伸技术; RAPD以PCR为基础，核心是DNA片段的扩增，与常规PCR不同在于引物。常规PCR需要一对引物，每个引物分子15～30nt，引物顺序根据待扩增的基因两端的顺序设计，因此要进行PCR时，必需知道待扩增基因的顺序。而RAPD分析时，只需要一个引物，长