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食品微生物学;2.4非细胞生物——病毒;2.4.1病毒的形态结构及主要类型
;衣 壳;三类典型形态的病毒:
廿面体对称的结构(球状)
螺旋对称的结构(杆状)
复合对称的结构(蝌蚪状)
大肠杆菌的T4噬菌体是由椭圆形的二十面体头部和螺旋对称的尾部组合而成,是病毒中复合对称的代表。;2.4.1病毒的形态结构及主要类型;(2)化学组成
主要由核酸和蛋白质组成。较复杂的病毒还含有脂类、多糖等。
(3)结构
核衣壳(基本构造) 核心:由DNA或RNA构成
病 衣壳:由许多衣壳粒蛋白构成
毒 包膜(非基本结构):由类脂或脂蛋白构成
刺突(非基本结构)
衣壳粒是由一种或几种多肽链折叠而成的蛋白质亚单位,衣壳粒的排列组合方式不同,使病毒表现出不同的构型和形状。;2.4.1.2病毒的大小与形态;;2.4.1.3病毒的结构与化学组成
1.病毒粒子的结构
病毒的基本形态结构有三种:
(1)螺旋对称-----烟草花叶病毒
(2)二十面体对称-----腺病毒
(3)复合对称-----T4噬菌体
;2.病毒的化学组成
绝大多数病毒主要是由核酸、蛋白质组成,只有少数病毒除上述成分外,还含有脂类、多糖等物质。;病毒;裸病毒和有包膜病毒的基本结构;2、按照寄生性分类:
(1) 微生物病毒
(2) 植物病毒
(3) 细菌病毒(噬菌体)
(4)脊椎动物病毒
(5)昆虫病毒
;3.病毒结构示意图;爱滋病病毒结构图;2.4.1.5亚病毒因子;2.4.2噬菌体
噬菌体(Phage)是一种侵染细菌的微生物病毒,广泛分布于自然界中。由于噬菌体在发酵工业中的危害较为突出而引起人们的广泛重视。
人们对大肠杆菌T—系噬菌体进行了大量的研究,获得了有关病毒的基础知识。因为它是一个很方便的生物模型和独特的研究工具,因为它是一个单细胞的宿主和很简单的寄生物。;2.4.2噬菌体;2.4.2.1噬菌体的形态
同其它病毒一样,噬菌体由核酸和蛋白质组成,核酸的单链或双链分子组成环状或线状,病毒的外壳有不同的形状和大小。
基本形态有:蝌蚪形,微球形,线状。
;2.4.2.2噬菌体的生活周期
(一) 噬菌体生长的测定:一步生长曲线
定量描述毒性噬菌体生长规律的实验曲线称为一步生长曲线。
少量病毒与敏感细胞接触,病毒吸附后,高倍稀释,继续培养,定时取样测定培养物中的病毒效价,以感染时间为横坐标,病毒效价为纵坐标,绘制出病毒特征性的繁殖曲线,即一步生长曲线 ;一步生长曲线;具体实验方法:
对数生长期的敏感菌悬浮液与适量的噬菌体混合,
混合比例为10︰1(避免几个噬菌侵染一个菌体))
↓
数分钟后,加入一定量的噬菌体抗血清,以中和
未被吸收的噬菌体
↓
用培养液高倍稀释,以免第二次吸附(感染)
↓培养
含噬菌体样品与敏感菌混合
↓
平板培养,计算噬菌斑数
;以培养时间为横坐标,以噬菌斑数为纵坐标,绘制成的曲线为一步生长曲线。
可分以下阶段:
潜伏期
裂解期
稳定期 ;结果可见:
1、潜伏期:吸附后开始一段时间,约5-10min,噬菌体的数量不见增加,说明噬菌体未完成复制和组装。
2、裂解期:感染后20-30min,平板中噬菌斑数量突然直线上升,表示噬菌体已从寄主细胞中裂解释放了。
3、裂解量:每个被感染的细菌释放新的噬菌体的平均数称为裂解量。
;
裂解期平均噬菌斑数
裂解量= ——————————
潜伏期平均噬菌斑数
;噬菌斑:
概念:将少量噬菌体与大量敏感菌混合培养在营养琼脂中,在平板表面布满宿主细胞的菌苔上,可以用肉眼看到一个个透明的不长菌的小圆斑,称为噬菌斑。(每个噬菌斑一般是由一个噬菌体粒子形成的。)
应用: 噬菌斑可用于检出、分离、纯化噬菌体和进行噬菌体的计数。;2.毒性噬菌体
通常把毒性噬菌体看作噬菌体的正常表现。
大肠杆菌T4噬菌体即为毒性噬菌体。
(一)毒性噬菌体侵入宿主细胞的过程:
五个阶段
1、吸附:与细胞的特异性受体结合,一种噬菌体吸附后不影响另外一种噬菌体的吸附,例如:大肠杆菌T4噬菌体吸附于细胞后,并不会影响到其
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