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免 疫 诊 断PPT
免 疫 诊 断;第一节 抗原或抗体的检测;㈠特异性:
㈡比例性:
㈢可逆性:
抗原-抗体
非共价建;1.凝集反应:
颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体结合,在有电解质存在时,比例适当,形成肉眼可见的凝集团块。;(1)直接凝集:
玻片法:定性检测未知抗原
如ABO血型鉴定、细菌鉴定
试管法:定量检测未知抗体
如肥达氏反应;(2)间接凝集:载体颗粒(RBC、乳胶等)
间接凝集:包被已知抗原,如Coombs test
反向间接凝集:包被已知抗体
;2.沉淀反应:
可溶性抗原(血清蛋白、细胞裂解液等)与相应抗体结合后,在有电解质存在时,比例适当,出现肉眼可见的沉淀物。
半固体琼脂凝胶为介质。;原理:
检测抗原;;(2)双向免疫扩散:;(3)对流免疫电泳:;(4)免疫电泳
原理:电泳后双扩;3.免疫标记技术:
标记物:荧光素、酶、放射性核素等
特点:敏感性高,定性、定位、定量;(1)免疫荧光法: FITC、PE;;(2)酶免疫测定:HRP、AP
*酶免疫组化法:
测定组织中或细胞表面抗原
*酶联免疫吸附试验(ELISA):
测定可溶性抗原或抗体;ELISA原理:
将已知抗原或抗体吸附于固相载体(聚苯乙烯微量反应板)表面,使抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤液将游离成分洗去。;方法:
*双抗体夹心法:
检测抗原;*间接法:
检测抗体
;*生物素-亲和素系统(BAS)ELISA:
生物素标记抗体,酶标记亲和素;(3)放射免疫测定法(RIA):
131I、125I标记,微量物质测定;(4)免疫印迹Western Blot;稀释的抗凝血;淋巴细胞亚群的分离与鉴定:
尼龙毛分离法:
E花结实验:;利用表面标志分离淋巴细胞亚群;流式细胞术: ;Lc功能测定:
1.淋巴细胞增殖/转化试验:
原理:
有丝分裂原等非特异刺激T、B细胞向淋巴母细胞转化、增殖。
方法:
MTT法:;氚标记的胸腺嘧啶核苷;2. T细胞介导的细胞毒试验:CTL;3. B细胞溶血空斑实验:;溶血空斑
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