[高三理化生]选修3 动物细胞工程.pptVIP

细胞工程理论复习 高考考点 1.植物的组织培养（B） 2.动物的细胞培养与体细胞克隆（A） 3.细胞融合与单克隆抗体（A） 3 5 6 7 返回 1. * * * * * * 细胞工程 动物细胞工程 植物细胞工程 微生物 细胞工程 与其他生物 工程的联系 植物组织与 细胞培养 植物体细胞 杂交 动物细胞与组织培养 动物核移植 ① ② ③ ④ ⑤ 动物体细胞克隆 动物细胞融合 单克隆抗体的制备 ⑥ ⑦ 第一节 细胞工程概述 1 、细胞工程的发展历史(时间、人物、做法、意义) 开创动物细胞培养的先河 首次成功进行的植物细胞与组织培养 获得第一个植物体细胞杂交植株 克隆羊”多利”的诞生 2、细胞工程的概念(对象、条件、主要利用技术、目的、应用) 3 、细胞工程的分类(分类依据、主要基本技术及其操作要点) 4、细胞工程的应用(主要总体目的、具体应用操作对象、意义) 5、细胞工程与其他生物工程的关系 第二节 细胞工程概述 1、 细胞全能性（含义、原理、全能性表达的条件、生物体内细胞不能表达全能性的原因、全能性大小差异的比较） 2、 植物组织培养（原理、条件、材料选择、一般过程、主要应用） 注意：①概念理解：外植体、愈伤组织、脱分化、再分化、胚状体 ②植物组织培养的培养基成分和要求（注意联系选修一） ③人工种子的结构及优点 4、 植物原生质体培养（原生质体的概念、来源、制备的基本过程、特点、主要应用） ５、 植物体细胞杂交（概念、特点、基本过程、存在问题及原因） ３、植物细胞培养（概念、原理、一般过程、生物反应器大规模培养植物细胞的过程、目的、分类、优点、应用） 注意：①概念理解：悬浮培养、继代培养 ②植物细胞培养的培养基成分和要求（注意与植物组织培养的培养基比较） 第三节 动物细胞工程 ２、 动物细胞和组织培养（原理、材料选择及原因、一般过程、培养条件、主要应用） 注意：①概念理解：原代培养、传代培养、细胞株＜特点应用＞ 、细胞系 ②胰蛋白酶处理的原因、目的和注意事项 ③动物细胞培养和植物细胞和组织培养的区别 １、 动物细胞工程（内容、基础） ①、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） ②、营养　（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） ③、温度和PH　　　　36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 ④、气体环境：O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） ２、 细胞核移植和动物体细胞克隆 ①概念及体细胞克隆的关键技术 ②克隆羊的产生过程和分析（原理、材料＜卵细胞的细胞质＞选择的原因、应用的生物技术、性状的遗传特点） ③克隆人和人体器官的技术路线分析 ④克隆动物的研究意义 克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 改良动物品种 治疗人类疾病，作为供体 保护濒危动物 ３、 细胞融合和单克隆抗体 ①细胞融合技术的概念、应用、促进细胞融合的方法、最重要的用途 ②单克隆抗体的概念、特点、制备的一般过程、主要应用 注意分析：⑴单克隆抗体的制备本过程利用了哪些原理？ ⑵为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ ⑶如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？ 思考： 1、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体. 融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体（常用酶联免疫吸附试验法），那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养 3.如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？ * * * * *