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二、各级菌种的培养基 (一)母种培养基 1.通用配方 2.配制过程 PDA 马铃薯200g、葡萄糖20g琼脂15~20g、水1000m1 返回本节 煮沸20min,取定量滤液 制马铃薯滤液 滤液沸时加入,融后加余料 融化琼脂 调解pH 勿污管口,控制装量 分装试管 准备灭菌 扎捆 10%NaOH或HCL 返回本节 返回本节 (二)原种、栽培种培养基 主料 棉籽壳87,麦麸10 辅料 白糖1,石灰1,过磷酸钙1 配方(%) 棉壳、麦麸干混余料溶于水后浇入主料清水翻拌至含水量 配制 1.种类(1)棉籽壳培养基 返回本节 主料 麦粒、玉米粒等98.5% 辅料 石膏粉1%,碳酸钙0.5% 调pH与分装 pH:一般为8.0左右原种培养基装大口瓶栽培种培养基装菌种袋 配方(%) 颗粒洗净,1%石灰水泡胀文火煮沸15~20min晾至无明水后拌入余料 配制 (2)颗粒培养基 返回本节 返回本节 栽培种的装袋 返回本节 三、培养基的灭菌 (一)母种培养基的灭菌 无菌检验约30℃条件下→空白培养2~3天 灭菌与摆斜面 摆斜面 1kg/cm2(103kpa、121℃) 20~30min 返回本节 母基灭菌与摆斜面 返回本节 (二)原种、栽培种培养基的灭菌 高压灭菌 1.5kg/cm2(152kpa、128.1℃)灭菌1~2h 返回本节 常压灭菌 100℃灭菌10h左右→再闷12h 要求 攻头、控中、保尾 返回本节 主要内容 1.菌种类型(母种、原种、栽培种的作用)2.高压锅、接种箱、接种室的构造及使用3.培养基(PDA、颗粒培养基的配制方法) 返回本节 1.黄毅.食用菌栽培. 北京:高等教育出社,19982.中国食用菌菌种网 1.栽培时为何不用母种作菌种? 2.母种扩成原种的目的是什么? 3.怎样使用接种箱? 4.菌种的基本要求是什么? 思考、讨论题 课外学习资源 返回本节 参考资料 1.中国食用菌杂志. 云南:《中国食用菌》编辑部 2004.1~6, 2005.1~6 2.杨新美.食用菌栽培学.第6章.北京:中国农业出版社,1996 3.张金霞.食用菌生产技术.第4~8章.北京:中国标准出版社,1999 4.黄毅.食用菌栽培.第二版.上册.第4章.北京:高等教育出版社,1998 5.张松.食用菌学.第6章.广州:华南理工大学出版社,2000 6.中国食用菌菌种网 7.中国食用菌信息网 / 返回本节 返回本章 菌种保藏与复壮 一、菌种保藏 (一)保藏目的及原理 (二)常用保藏法 (三)保藏注意二、菌种复壮 (一)菌种的衰退 (二)复壮方法 (三)防衰措施 返回本章 学习情景2-4 一、菌种保藏 (一)保藏目的及原理 目的 原理 创造不利于菌种生长的一切条件,使其代谢处于休眠状态。 使菌种 不生长 不死亡 不污染 不降低或不丧失其优良性 以尽量延长使用时间 返回本节 低温 干燥 无氧 缺营养 不利条件 返回本节 (二)常用保藏法 以母种形式保藏 特点 简便保藏时间短易污染及退化不适于草菇等菌类 1.斜面低温法斜面菌种置4~6℃冰箱中(3~6个月) 返回本节 返回本节 2.矿油保藏法 无菌检验 ? 注入种管 淹没斜面约1cm 矿油处理 灭菌:152kpa、30min去水:40~50℃烘至无色透明 口堵胶塞 用时转管再转管 返回本节 返回本节 3.自然基质保藏法 基质的处理 麦粒浸透、煮熟麸皮拌湿 装管 防衰老保藏时间长转接后生长旺易污染,灭菌要彻底 特点 灭菌 接种 培养 干燥器去水 返回本节 (三)保藏注意 用保种培养基 及时保藏(菌丝占斜面2/3) 最好换胶塞 用时活化 严防棉塞受潮 返回本节 二、菌种的复壮 概念 确保或恢复菌种优良性能的措施 (一)菌种的衰退 形态改变、生长慢、抗逆性差、产量及质量下降 表现 根源 内因 菌种的遗传物质发生了负变 外因 传代过多,条件不适宜 返回本节 (二)复壮法 1.繁殖交替法 2. 经常改变培养条件 3.转管时只取尖端菌丝 组织分离 母种 孢子分离 再生母种 栽培 子实体 返回本节 (三)防衰措施 保证菌种的纯培养 严格控制传代次数 用适宜菌龄的菌种 用适宜培养条件及保藏条件 返回本节 1.设计菌种厂的依据是什么?2. 怎样防止菌种的衰退? 3.怎样判断菌种的衰退?4.自然基质保藏法是怎样进行的?有何优缺点? 1.黄毅.食用菌栽培. 北京:高等教育出社,19982.中国食用菌菌种网 作业题 1.栽培时为何不用母种作菌种? 2.母种扩成原种的目的是什么? 3.怎样使用接种箱? 4.菌种的基本要求是什么? 思考、讨论题 课外学习资源 返回本节 第4章 食用菌菌种生产 第一节 菌种概述第
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