绿脓杆菌特有的Tsi2三维结构-LibraryInstituteofBiophysics.PDFVIP

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绿脓杆菌特有的Tsi2三维结构-LibraryInstituteofBiophysics

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2012, 39(7): 640~646 脓杆菌特有的Tsi2 三维结构 ———一种全新卷曲螺旋构象的类抗毒素蛋白* 王维1, 2) 丁璟珒1)** 王大成1)** 1) 2) ( 中国科学院生物物理研究所,生物大分子国家重点实验室,北京100101 ; 国科学院研究生院,北京100039) 摘要 绿脓杆菌(Pse udomonas aeruginosa)利用六型分泌系统(T6SS) 向其他竞争性细菌分泌毒素效应分子Tse2,这是一种新发 现的绿脓杆菌获得生存优势的分子机制 为了避免同类间的误杀,绿脓杆菌合成一种特异结合Tse2 的抑制蛋白Tsi2 来保护 自己 序列分析显示,Tsi2 是绿脓杆菌特有的一种新型类抗毒素蛋白 我们利用SAD 方法成功地 析了Tsi2 1.8 分辨率的 晶体结构 Tsi2 的三维结构采用一种规则的卷曲螺旋的结构特征,这是抗毒素分子中的一种全新的折叠方式,不同于经典的 抗毒素分子在没有结合毒素分子状态下采用无规则构象的结构特征;二聚体是Tsi2 的功能单位,二聚体内两个Tsi2 单体通 过广阔的疏水相互作用紧密结合,形成 “夹子”状独特的二聚体组装方式;位于二聚体界面上的两个凹槽分别结合对称分子 的两段螺旋,提供了Tsi2 与Tse2 结合可能的分子部位 该研究工作结果对于认识Tsi2 抗毒素蛋白的分子本质,揭示其发挥 抗毒素活性的结构基础,并为进一步开展Tse2-Tsi2 复合物的结构与功能研究奠定了坚实的基础 关键词 绿脓杆菌,六型分泌系统,Tsi2-Tse2,抗毒素,卷曲螺旋 学科分类号 Q5 DOI: 10.3724/SP.J.1206.20 12.00126 绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa) 是医院感染 避免误杀,绿脓杆菌同时合成专一的Tse 抑制蛋 的一种常见的条件致病菌,能引起心内膜炎、眼角 白:Tsi1 ~3 (Tse-specific immunity protein 1 ~3), 膜炎、肺部囊肿纤维化、败血症等病症,其极强抗 并将其定位于相应的细胞部位,通过蛋白质间直接 药性使其成为临床上研究细菌抗生素抗性重要的模 作用(direct interaction)抑制Tse 毒性[5-6] 式生物[1-2] 一直以来,这种强耐药性被认为是绿 Tse Tsi 在基因水平上成对存在,作为操纵 脓杆菌能够广泛存活并获得生存优势的重要原因, 子(operon)被转录翻译,通过蛋白质间的直接相互 但随着近年来绿脓杆菌六型分泌系统(T6SS)的深入 作用形成复合物[5-6] 这种模式极像细菌 广泛存 研究,为其获得生存优势提供了一种新的 释:与霍 在的毒素- 抗毒素系统(toxin-antitoxin system,TA [3] [7-8] 乱弧菌T6SS 靶向攻击宿主细胞不同 ,绿脓杆菌 系统) :毒素- 抗毒素作为操纵子一起被转录翻 T6SS 的攻击对象是与其接触(cell-contact-dependent) 译,当细菌感受外界生存压力,抗毒素被Lon 蛋 的其他细菌,通过向靶细胞分泌效应分子引起竞 白酶或蛋白酶体降 后释放毒素 毒素分子主要参 争性细菌死亡从而获得生存优势[4-5] Mougous 研 与基因复制 蛋白质翻译的调节而引起细胞凋亡或 究组鉴定出3 种绿脓杆菌T6SS 效应分子:Tse1~3 生长停滞,例如,VapC ,HigA,MazF,Y

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