种子纯度检验教学课件.pptVIP

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* * * 种子纯度检验 小麦种子蛋白质电泳法测定小麦种子纯度不受自然影响 ,测定结果较为准确 对实现种子质量的前控将起到巨大作用 ,可将小麦 假冒伪劣种子消灭在种植之前,以避免更大的经济损失 小麦种子蛋白质电泳法测定纯度与田间小区种植鉴定结果一致 ,二者呈显著的正相关关系 小麦醇溶蛋白是种子胚乳中的主要贮藏蛋白质 ,编码醇溶蛋白基因的 6个位点(G1i-A1,G1i-B1,Gli-D1,G1i-A2,G1i-B2,Gli-D2)存在大量的等位基因变异。 从电泳图 谱上发现不同等位基因间的差异主要表现在蛋白谱带的数量、相对迁移率等方面。 实验分组: 8人为1组配试剂 每人3个样品 一、试验材料: 绵麦37(省区试对照品种) 二、药品器材 Bio-RAD垂直电泳仪 试剂配制 样品提取Buffer(100ml):(每组20ml) 甲基绿0.05g,2-氯乙醇25ml 10×电极buffer(1L):(每组100ml) 冰醋酸40ml,甘氨酸4g,使用前稀释10倍 凝胶buffer(1L):(每组200ml) 冰醋酸20ml,甘氨酸1g。 凝胶溶液(200ml): Acr=20g,Bis=0.8g,尿素12g,抗坏血酸0.2g,硫酸亚铁0.008g,溶于凝胶buffer中。 样品醇溶蛋白提取:取单粒种子,称重,用样品钳夹碎,放入0.5ml离心管中,然后按1mg加5μl的比例加入样品提取液,室温浸提过夜,使用前用10000rpm离心10min。 凝胶配制: 取适量的凝胶溶液,加入适量的10%过硫酸胺和TEMED,迅速摇匀,灌胶,插好样品梳,让其在5-10分钟内完全聚合。一般为每1ml凝胶溶液加入1μl的10%过硫酸胺和TEMED。 * *

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