表达传染性喉气管炎病毒gB主要抗原表位区域重组新城疫病毒的构建演示课件文.pptVIP

;目录;摘 要; 采用RT-PCR检测接种重组病毒的鸡胚尿囊液，结果表明重组病毒中含有相应的外源基因。利用gB的抗血清检测重组病毒中gB的表达，间接免疫荧光试验表明，在感染重组病毒的BSR-T7/5细胞中目的蛋白得到表达。本研究为研制和开发传染性喉气管炎重组新城疫二联活疫苗奠定基础。 ;gB蛋白;NDV作为病毒载体应用优点;背景介绍;鼻窦肿胀，腔内有粘液;主要实验材料;构建PBR-FL-gB1-400重组质粒;重组病毒中gB1-440基因片段的检测;重组病毒gB1-440基因表达的检测 ;重组病毒的生长动力曲线;结果;重组病毒中外源目的基因的检测及稳定性鉴定以rL-gB1-440感染的5代、10代、15代、20代的鸡胚尿囊液提取的病毒RNA为模板，RT-PCR扩增得到约l 300 bp片段，而NDV La sota株感染的鸡胚尿囊液中未扩增出任何的片段，表明gB1-440基因在rL-gB1-440中传代多次仍具有遗传稳定性;;;讨论; 研究表明插入ILTV完整gB基因的重组NDV不能完全保护ILTV的攻击，推测可能是由于不充分的囊膜包裹以及细胞表面外源蛋白表达使得病毒不能诱发较强免疫诱导。同时，研究还显示，外源蛋白的插入表达降低NDV的致病力，其影响程度取决于插入基因的性质和长度因此，本研究在现有的NDV rLa sota疫苗株反向遗传操作技术的基础