分子生物学在检验医学中的应用教材幻灯片.pptVIP

?2、? 后生性调控标志物 分子生物学在检验医学中的应用 ?一、分子生物学在检验医学中的常用技术 1、? PCR技术 2、? RT-PCR技术 3、? RFLP 4、? SSCP 5、? MSP 6、? 测序 ?二、外源性疾病的检验与诊断： 1、? 细菌、支原体、衣原体、寄生虫、 病毒等 2、? SARS冠状病毒的分子生物学检测 BNIoutS/BNoutAs: sense ATGAAT TAC CAA GTC AAT GGT TAC antisense CAT AAC CAG TCG GTA CAG CTA C FraGment lenGth 195 bp  BNIinS/BNIAs: sense GAA GCT ATT CGT CAC GTT CG antisense CTGTAGAAA ATC CTA GCT GGA G Fragment length 110 bp SAR1s/SAR1as: sense CCT CTC TTG TTC TTG CTC GCA antisense TAT AGT GAG CCG CCA CAC ATG Fragment length 150 bp Amplicon sequence (BNI-1, Bernhard-Nocht Institute, Hamburg, Germany) TACCGTAGACTCATCTCTATGATGGGTTTCAAAATGAATTACCAAGTCAATGGTTACCCTAATATGTTTATCACCCGCGAAGAAGCTATTCGTCACGTTCGTGCGTGGATTGGCTTTGATGTAGAGGGCTGTCATGCAACTAGAGATGCTGTGGGTACTAACCTACCTCTCCAGCTAGGATTTTCTACAGGTGTTAACTTAGTAGCTGTACCGACTGGTTATGTTGACACTGAAAATAACACAGAATTCACCAGAGTTAATGCAAAACCTCCACCAGGTGACCAGTTTAAACATCTTATACC SARS-specific primers: Cor-p-F2 (+) 5CTAACATGCTTAGGATAATGG 3, Cor-p-F3 (+) 5GCCTCTCTTGTTCTTGCTCGC 3, Cor-p-R1 (-) 5CAGGTAAGCGTAAAACTCATC 3, Product size: Cor-p-F2/Cor-p-R1 :368 bp Cor-p-F3/Cor-p-R1 :348 bp Government Virus Unit 9/F Public Health Laboratory Centre 382 NAm Cheong Street Shek Kip Mei Kowloon, Hong Kong SAR Hong Kong - SAR China COR-1,COR-2: sense 5 CAC CGT TTC TAC AGG TTA GCT AAC GA 3 antisense 5 AAA TGT TTA CGC AGG TAA GCG TAA AA 3 Product size: 310 bp Queen Mary Hospital The University of Hong Kong University Pathology Building Hong Kong - SAR China HKU: sense 5 TACACACCTCAGCGTTG 3 antisense 5 CACGAACGTGACGAAT 3 Product size 182 bps 2n 2 3n 3 4n 4 5n 5 6n 6 2）LDH-A和LDH-B亚基遗传变异及  对检验结果的影响 基因变异可导致酶分子组成结构发生变化，对酶活力和酶的物理化学性质造成影响，可给临床医生造成诊断陷阱(pitfall)，因为在不同疾病状态下，从相关联的组织器官中释放出的酶与预期的不同，病人血清酶活力不能完全反映各种疾病的状态，容易造成误诊。 LDH-A基因变异类型 _________________________________________________ 变异位置 DNA 氨基酸置换 影 响 ———————