中国药品检验标准操作规范2010年版101升压物质检查法.docVIP

升压物质检查法 大鼠血压法! 1 实验材料及用具 1.1 天平 精度0.01mg或0.1mg，标准品或供试品称量用；精度1mg，试剂称量用；精度1g，大鼠称量用。 1.2 血压记录装置 记录仪或记纹鼓、球型汞柱血压计、压力传感器、描记杠杆。 1.3 实验用具 注射器（1ml，精度0.01ml）、小研磨器、容量瓶、吸管、移液管、带塞三角瓶、带塞小瓶、硬质大试管（或三角瓶）附空心玻璃球（盖管口用）、小漏斗、安瓿、电炉、水浴锅、脱脂棉、绳、线、pH试纸、滤纸、各种管径乳胶管。 1.4 手术用器械 大鼠固定板、手术剪、直镊、眼科直镊、眼科弯镊、手术刀、止血镊、动静脉夹及插管、气管插管。 1.5 试剂 氯化钠、冰醋酸、乌拉坦、肝素钠、（甲磺酸）酚妥拉明。 2 溶液配制 2.1 生理盐水 称取氯化钠适量，加水配成0.9%溶液。 2.2 0.25%醋酸溶液 量取冰醋酸适量，加水配成0.25%溶液。 2.3 25%乌拉坦溶液 称取乌拉坦适量，加水配成25%溶液。 2.4 肝素钠溶液 称取肝素钠适量，按每毫克标示效价（注射液按每毫升标示效价），加生理盐水配成1000U/ml溶液。 2.5 甲磺酸酚妥拉明溶液 2.5.1 粉末 称取适量，加煮沸放冷并调节pH为3.2的水，配成1mg/ml溶液。 2.5.2 注射液 用上述pH为3.2水稀释成1mg/ml溶液。 2.6 标准品溶液 2.6.1 取垂体后叶标准品放置至室温。 2.6.2 割开标准品小管（注意勿使玻屑掉入）迅速精密称量，置小研磨器中。 2.6.3 将称得的毫克数，乘以标示的每毫克升压素单位数，得总单位数。 2.6.4 精密加入0.25%醋酸溶液0.5ml，仔细研磨成匀浆。 2.6.5 将研磨器移至硬质大试管中，再精密补加0.25%醋酸溶液使成1.0U/ml的溶液。 2.6.6 试管口轻放一空心玻璃球，将试管浸入沸腾的水浴中，沸水液面要超过试管内溶液液面，时时振摇试管，准确加热煮沸提取5分钟，取出迅速冷却至室温，用滤纸过滤。 2.6.7 滤液分装于安瓿中熔封，置4~8℃保存备用，如无沉淀析出，可在3个月内使用。 2.7 标准品稀释液 2.7.1 实验当日取标准品溶液，放置至室温。 2.7.2 割开安瓿，精密量取标准品溶液适量，用生理盐水配成0.1U/m的稀释液。 2.8 供试品溶液与稀释液 2.8.1 按《中国药典》正文规定的限量，配成适当浓度的供试品溶液（如缩宫素项下，配成2.0U/ml溶液）。 3 实验动物 健康无伤，体重300g以上的雄性大鼠。 4 检定法 4.1 麻醉动物和手术。 4.1.1 将动物称重。 4.1.2 按约0.4ml/100g体重腹腔注射25%乌拉坦溶液，使麻醉。 4.1.3 动物麻醉后，仰卧固定于手术（板）台上（动物需保持体温）。 4.1.4 沿颈部正中线切开，分离气管、切口，及时吸出分泌物。 4.1.5 分离出一侧颈动脉，剥离附着的脂肪组织和神经，动脉底下穿二根线，靠远心端一线将动脉结扎，近心端用动脉夹夹住。 4.1.6 分离一侧股静脉或颈静脉，并穿线二根，靠远心端一线结扎，近心端用静脉夹夹住。 4.2 测压装置和记录仪的调节（以压力传感器和记录仪法操作步骤为例）。 4.2.1 将球型汞柱血压计、动脉插管、压力传感器与记录仪连接好。 4.2.2 用生理盐水将压力传感器、球型汞柱血压计和动脉插管中的空气排尽（每个连接处必须牢固，不漏气，如漏气会影响血压的测量）。 4.2.3 接通记录仪的电源。 4.2.4 灵敏度或基线的校正 用生理盐水加压，将球型汞柱血压计液面升高到13.3kPa（100mmHg），调节记录仪笔的振幅为80cm或满量程；将球型汞柱血压计液面回到0时，记录笔也相应回零点基线，反复数次调节使稳定，然后关上记录笔，并就爱那个传感器与汞柱血压计的通道关闭。 4.2.5 在颈动脉上剪一小口，插入动脉插管（或用12号短钝针头）并用另一线结扎固定插管与动脉，使插管和动脉处在自然状态下，避免使动脉扭曲，影响血压的测量。以生理盐水棉球覆盖切口。 4.2.6 打开动脉夹，从插管上的三通中注入1000U/ml肝素溶液0.4ml左右，以防血液凝固堵塞插管影响血压测量。 4.2.7 用生理盐水将静脉插管中的空气排尽，在股静脉上用针头扎孔插入静脉插管（或用12号短钝针头），用线固定，同时注射适量肝素溶液抗凝（不超过100U/100g体重）。以生理盐水棉球复盖切口。 4.3 稳压 4.3.1 接通记录笔，走纸记录正常血压（适当调节记录笔的位置）。 4.3.2 从静脉插管中缓缓注入适宜的交感神经阻断药，如甲磺酸酚妥拉明，以1mg/ml的溶液按0.1mg/10