[研究生入学考试]细胞工程.docVIP

细胞工程（Cytotechnology or Cell engineering） ?细胞工程是以细胞为主要研究对象，在组织、细胞、细胞器和分子水平上，运用工程学原理，按照预定目标，改造生物学性状、生产生物产品的应用型科学技术。 一、研究内容 根据实验材料来源和操作对象，可以分成五类： （一）组织、器官和细胞培养 ?利用生物体各部分组织、器官或者细胞进行离体培养（in vitroculture）的技术。 它是细胞工程的基本技术。 ?胚胎移植?试管动物in vitro fertilization, IVF），显微受精、胚胎体外培养和移植技术所获得的各种动物。 （三）染色体工程 ?借助于物理、化学等方法，使某种生物染色体数目、结构和功能发生改变的技术。 （四）细胞遗传工程 ?转基因动植物?克隆动物 ?采用自然或者人工方法使两个和几个不同细胞或原生质体融合为一个细胞，用于产生新物种或品系及产生单克隆抗体。 研究任务举例 ①细胞或者组织所需营养和环境条件； ②植物材料的快繁方法； ③细胞融合方法和机理； ④种质资源的离体保存方法和机理； ⑤动物胚胎移植； ⑥动物克隆技术； ⑦改良生物品种； ⑧创造新的物种等等。 二、发展简史 （一）探索时期 ?1839年Schwann和Schleiden的细胞学说； ?法国、德国科学家进行了动物细胞体外培养尝试； ?1902年Haberlandt进行植物细胞体外培养尝试； ?1907年美国的Harrison建立了动物细胞培养的基本模式； ?随后Carrel 1922年Kotte和Robbins进行的植物根尖和茎尖培养获得成功； ?1925年Laibach将亚麻种间杂交形成的难成活的种子的胚取出，在培养基上培养成熟； ?此外，1892Driesch用海胆2细胞胚胎获得了2个遗传背景相同的幼虫个体，最早的克隆动物。 （二）培养技术建立时期 ?组织或细胞需要营养十分复杂，既有无机成分也有有机成分，还需要各种生长调节物质。离体培养的细胞只能从营养液中获得；因此各种适宜培养基的建立是培养技术的关键。 植物培养技术的建立 ?1937年White发现了B族维生素和IAA对植物根离体生长的促进作用；并用VB6（吡哆醇）、VB1（硫胺素）和VB5（烟酸）取代酵母提取液成功； ?1937年Gautheret也发现B族维生素和IAA能促进山毛柳形成层的生长； 法国Nobecoort 1948年Skoog和崔澂发现腺嘌呤可以诱导烟草芽的形成，认为腺嘌呤和生长素的比例是控制芽形成的关键； ?1953年Muir成功进行烟草等细胞的悬浮培养； ?1957年Skoog和Miller提出了植物激素控制器官形成的概念； ?1958年Steward和Reinert几乎同时发现胡萝卜的体细胞可转变成类似合子胚的结构，成为体细胞胚。 动物细胞培养技术的建立 ?40年代后基本都使用培养瓶进行体外培养； ?1953年Grey建立了人HeLa细胞系（从美国黑人妇女Helen Lane的子宫颈癌取得）； ?1958年Okada发现仙台病毒能稳定诱导细胞融合； ?1938年Spemann提出核移植的设想； ?1939年Fankhauser等在两栖类上诱导出三倍体； （三）迅速发展时期 植物培养技术 ?原生质体培养和细胞融合1960年Cocking用酶法分离番茄根和烟草叶片原生质体成功； 1971年Nagata等将烟草原生质体培养出再生植株； 1972年Carlson用NaNO3进行了烟草原生质体融合； 1974年Kao用PEG进行了大豆和烟草间原生质体融合； 1976年Smith进行了HeLa细胞和烟草细胞间的融合； 1981年Zimmerman用改变电场方法进行了原生质体融合； 目前已经获得了大量种间、属间杂种。 ?植物快繁技术?花药培养技术?次生物质生产细胞融合技术?次生物质生产?克隆技术1997年克隆羊“Dolly”诞生，随后有鼠、牛、猪、兔和猴等。 ?胚胎移植和试管动物?胚胎干细胞（Embryonic Stem cellES细胞是由早期胚胎内细胞团或者原始生殖细胞分离出来的多潜能细胞，保持未分化状态，在适当条件下可被诱导分化。成体干细胞？ 三、发展趋势 ?人类社会面临环境、食品、能源等全球性危机，希望利用细胞工程来解决 (一）医学 1.制药业： 2.免疫避孕药； 3.试管婴儿； 1.改良品种 2.新农药 3.食品和饲料生产 （三）环境保护 1.工程菌处理污水；能分解脂肪、蛋白质和纤维素等； 2.工程菌吸收土壤中的有害物质，如重金属等； 3.工程菌进行环境修复； 能源主要有：化石能源、原子能等不可再生能源和太阳能、风能等可再生能源。 ?培育高光合效率的植物； ?利用工程菌来生产乙醇或者H2 第一章细胞培养基本技术 细胞培养的基本概念 ?传代：细