稀土离子与核酸及其碱基的相互作用北京大学教务部.docVIP

稀土离子与核酸及其碱基的相互作用研究 Research on the Interaction of Lanthanide ion with DNA and the Bases 化学与分子工程学院98级 赵怡芳 摘要 本研究以电分析化学与紫外－可见吸收光谱法为主要手段，较深入、系统的研究镧系稀土离子Eu3+与核酸及其碱基间的相互作用、作用机理及生物功能。 通过滴汞电极循环伏安方法，可以清楚的观察到镧系稀土离子Eu3+与小牛胸腺DNA间的络合反应，计算出了Eu3+离子与dsDNA相互结合的结合常数(和结合比m。同时，通过Eu3+离子与dsDNA和A、T、G、C等碱基及其混合物溶液的紫外-可见吸收光谱图，计算出了Eu3+离子与AMP、Adenine等碱基之间相互结合的结合常数K，从而进一步证实Eu3+离子与DNA之间存在着的相互作用，进而推断Eu3+离子可以与dsDNA的双股螺旋相互结合。对比抗癌药物顺铂[Pt(NH3)2Cl2]的药物作用机理，Eu3+离子在此方面以及对癌症的分析和治疗都具有同样甚至更加重要的理论和实际意义。 Abstract Interaction of lanthanide ion Eu3+ with calf thymus DNA has been investigated voltammetrically at hanging mercury drop electrode. In suitable concentrations, the lanthanide ion Eu3+ interacts remarkably with DNA polymer. The values and the ratio of binding constants between Eu3+ and DNA are calculated. According to the UV-Vis Spectroscopy studies of Eu3+ ion with dsDNA and A, T, G, C, the values of binding constants between Eu3+ and AMP, Eu3+ and Adenine are calculated, too. The interaction mechanism could be that the Eu3+ ions are chelated by the DNA biopolymer. 一、前言 核酸是生物大分子，是遗传信息的载体，是分子生物学中的重要研究对象之一，它可以与许多化合物发生相互作用（如金属离子及其络合物、小分子有机化合物及蛋白质等）并进而影响到核酸的复制及断裂。稀土虽不是自然界的动植物体所必需的元素，但目前我国开展的稀土微肥和饲料中添加微量稀土化合物的使用，使对稀土的生理作用研究具有理论及现实意义。因此，对稀土与核酸及其碱基的作用机理及生物功能的研究是生命科学研究领域中极其重要的内容，对探索生命奥妙，揭开遗传、变异本质和了解生物物质的新陈代谢，以及进行重大遗传疾病的预防都具有重要的意义。 “顺铂”[Pt(NH3)2Cl2](cisplatin)是现今世界上应用最广泛的抗癌药物之一，是癌症化疗的重要用药，从生化、药理学的研究得知，顺铂是典型的遗传物质DNA摧损剂，明显地影响细胞生长分裂的正常运作而杀死癌细胞。自70年代顺铂抗癌活性的发现及应用以来，顺铂已成为目前世界各国临床上最为有效的抗癌药之一。现已成功地开发出毒性远低于顺铂的环硫铂，卡铂等第二代，第三代铂类抗癌剂。与此同时，科学家发现一些非铂金属络合物表现出不同程度的抗癌活性，其中某些络合物具有比顺铂活性高、毒性低或抗癌谱系与顺铂不同的特点。统计资料表明，化合物从最初筛选到最终成为上市的新药的平均几率为八千至万分之一，研究周期为8-12年，费用达上亿美元。金属抗癌剂(如铂类)的命中率显然要大得多，且开发周期较短，费用也较少。因而人们对金属抗癌剂的研究寄以厚望。 本实验中，以电化学方法和紫外－可见吸收光谱法研究Eu3+离子与DNA的相互作用这部分工作是我在北京大学化学与分子工程学院庄乾坤老师实验室里进行的，以紫外-可见光谱法为主要研究手段，研究镧系稀土离子Eu3+与核酸及其碱基的相互作用的工作则是在2001年暑期，通过“君政学者暑期学术交流”活动，在台湾新竹清华大学化学系黄国柱老师实验室中完成的。 二、实验药品、仪器 （一）药品： 本试验所使用的药品结构、来源、及其纯度如下所示 名称 分子式 结构 纯度 来源 Adenine C5H5N5 99% Sigma Guanine C5H5N5O 99% Sigma Thymine C4H5N3O 99% Sigma Cytosine