植物组织培养第九章参考.pptVIP

第9章 植物组织培养脱毒 学习目的与要求 学习重点与难点 本章主要内容 1 离体培育植物无毒苗的意义 2 病毒特性及其侵染 3 植物脱毒原理及方法 4 植物脱毒苗的检测与保存 第9章 植物组织培养脱毒 学习目的与要求 掌握植物脱毒原理与方法，主要是茎尖培养脱毒的原理与方法；了解植物脱毒苗的检测与保存方法；了解植物无毒苗的意义。 第9章 植物组织培养脱毒 学习重点与难点 重点：植物脱毒原理与方法、植物脱毒苗的检测与保存 。 难点：植物脱毒原理与方法 第9章 植物组织培养脱毒 1 离体培育植物无毒苗的意义 许多农林作物，容易感染病毒，会造成产量和品质的下降。 离体培育无病毒苗已成为农作物、园林植物、经济作物的优良品种繁育、生产中的一个重要环节。 无毒良种种苗具有产量提高、品质提高以及抗性增强的优点。 “无病毒”是一个相对概念，并不是绝对不带有任何病毒，只是不带有对当地生产危害最大的几种病毒而已。 第9章 植物组织培养脱毒 2 病毒特性及其侵染 2.1 病毒简介 病毒是指在活体细胞内寄生增殖的不具细胞结构的生命体。一个完整的病毒个体称为病毒粒子侵染植物的病毒粒子主要有杆状、线状和球状3种类型。 2.2 病毒的主要传播途径 （1）介体传播； （2）机械传播 （3）无性繁殖材料和嫁接传播 （4）种子和花粉传播 第9章 植物组织培养脱毒 2 病毒特性及其侵染 2.3 受病毒侵染病株外部症状 受侵染后，植株表现为局部或系统花叶、皱 缩、卷叶、黄化，老叶上出现紫色边缘的褪绿 斑，也有沿叶脉形成紫色羽状斑驳的，春季明显。 2.4 病毒特性及侵染 大多数病毒不经种子传播；病毒在植物体内 分布不均一，越接近生长点浓度越稀；植物细 胞和病毒繁殖之间存在竞争；病毒靠维管组织 传播或胞间连丝传递。 第9章 植物组织培养脱毒 3 植物脱毒原理和方法 第9章 植物组织培养脱毒 3 植物脱毒原理和方法 3.1 热处理脱毒 （1）原理 热处理不能杀死病毒，只是钝化病毒的活 性；热处理是一种物理效应，与冷处理一样可 以加速植物细胞的分裂，植物细胞在与病毒繁 殖的竞争中取胜处于优势地位 。 第9章 植物组织培养脱毒 3 植物脱毒原理和方法 3.1 热处理脱毒 （2）方法 ①愈伤组织热处理 在愈伤组织增殖阶段用低温37－38℃ 处理2周、4周或8周；或高温50 ℃处理3－5min。 ②热空气处理脱毒法 将试验母株放在35～40 ℃的生长室中生长一阶段，使其顶端分生组织比次生分生组织生长迅速，然后切取其茎尖分生组织进行离体培养或嫁接繁殖。 第9章 植物组织培养脱毒 3 植物脱毒原理和方法 3.1 热处理脱毒 （3）热处理脱毒的局限性 ①并非所有的病毒都对热处理敏感。一般的热处理只对等径的、线状的病毒和类菌质体起作用。 ②延长热处理时间，病毒钝化效果好，同时也可能会钝化植物组织中的抗性因子而降低处理效果。 ③热处理后只有一小部分植株能够存活。 第9章 植物组织培养脱毒 3 植物脱毒原理和方法 3.2 组织培养脱毒法 组织培养脱毒法包括微茎尖培养脱毒、愈伤组织培养脱毒、珠心组织培养脱毒3种方法。 3.2.1 微茎尖培养脱毒 （1）原理 ①病毒在植物体内分布不均匀，越接近顶端 分生组织，病毒浓度越稀。 ②病毒DNA分子与细胞分裂蛋白质合成竞 争，在迅速合成的植物细胞中正常合成的蛋白 质占优势。 第9章 植物组织培养脱毒 3 植物脱毒原理和方法 3.2.1 微茎尖培养脱毒 （2）技术关键 茎尖培养脱毒的关键是获取适当大小的外植体，茎尖要小到可以脱去病毒，又要保证再生植株的成活，选取外植体时要注意： ① 同一种病毒在植物体内分布位置不同； ②不同种类病毒在同一种植物中的分布位置不同 ； ③茎尖越小，对培养基的要求越高，成功率越低。 第9章 植物组织培养脱毒 3 植物脱毒原理和方法 （3）操作程序 第9章 植物组织培养脱毒 3 植物脱毒原理和方法 3.2.2 愈伤组织培养脱毒 （1）原理 ①病毒在植物体内不同器官或组织分布不均匀。无毒的细胞在愈伤组织的增殖中是获得无病毒组织的基础。 ②病毒复制的能力衰退或丢失。病毒在愈伤组织的快速增殖中，病毒的复制能力衰退。 ③继代培养的愈伤组织产生抗性变异。 第9章 植物组织培养脱毒 3 植物脱毒原理和方法 3.2.2 愈伤组织培养脱毒 （2）技术关键 诱导可再生出植株的愈伤组织。 （3