第17章蛋白质生物合成生化.pptx

蛋白质的生物合成（翻译）;;本章重要知识点;蛋白质生物合成的概念;　;（1）氨基酸的活化 （2）肽链的生物合成 （3）肽链形成后的加工和靶向输送;（1）维持多种生命活动 （2）适应环境的变化 （3）参与组织的更新和修复;第一节蛋白质生物合成体系;;一、mRNA是蛋白质生物合成的直接模板;遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子(cistron)。 原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位，转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质，为多顺反子(polycistron) 。 真核mRNA只编码一种蛋白质，为单顺反子(single cistron) 。 ;　;遗传密码;遗传密码包括64 个密码子 (A, G, C, U) ， 43 = 64;遗传密码表;遗传密码的特点;2. 连续性(non-punctuated);基因损伤引起mRNA阅读框架内的碱基发生插入或缺失，可能导致框移突变(frameshift mutation)。;许多真核生物基因转录后有一个对mRNA外显子加工的过程，可通过特定碱基的插入、缺失或置换，使mRNA序列中出现移码突变、错义突变或无义突变，导致mRNA与其DNA模板序列不匹配，使同一前体mRNA翻译出序列、功能不同的蛋白质。这种基因表达的调节方式称为mRNA编辑（mRNA editing）。 ;3. 简并性(degenerate);密码子简并性的生物学意义：减少有害突变。 遗传密码的特异性主要取决于前两位碱基。　 　　　GCU　　　　　　　 ACU 　　　GCC　　　　　　　 ACC 　　　GCA　　　　　　　 ACA 　　　GCG　　　　　　　 ACG;遗传密码表;各种氨基酸的密码子数目;密码子偏爱性;4. 通用性(universal);已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。;5. 摆动性(wobble); ;U;二、核蛋白体是蛋白质生物合成的场所;;核蛋白体的组成;原核生物核蛋白体结构模式 ;原核生物核蛋白体结构模式;三、tRNA是氨基酸的运载工具及蛋白质生物合成的适配器;二级结构; ;四、蛋白质生物合成需要酶类、蛋白质因子等;;（二）蛋白质因子;蛋白质生物合成的能源物质为ATP和GTP; 参与蛋白质生物合成的无机离子有Mg2+、K+ 等。;第二节氨基酸的活化;氨基酸与特异的tRNA结合形成氨基酰-tRNA的过程称为氨基酸的活化。 参与氨基酸的活化的酶：氨基酰-tRNA合成酶。;反应过程;氨基酸 ＋ATP-E 氨基酰-AMP-E ＋ PPi ;第二步反应： 生成氨基酰- tRNA;氨基酰-tRNA合成酶;氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。;氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性。;氨基酰-tRNA的表示方法; ;二、真核生物起始氨基酰-tRNA是Met-tRNAiMet;甲硫氨酸— tRNAfMet 甲酰化 N-甲酰甲硫氨酰-tRNA (fMet-tRNAfMet) 识别 mRNA的起始密码子AUG 翻译起始复合物;fMet-tRNAfMet的生成由转甲酰基酶催化，甲酰基从N10-甲酰四氢叶酸转移到甲硫氨酸的α-氨基上。 ;第三节肽链的生物合成过程;肽链的生物合成过程是翻译的中心环节。翻译时，从mRNA的起始密码子AUG开始，按5ˊ→3ˊ方向逐一读码，直至终止密码子。于是，合成中的肽链从起始甲硫氨酸开始，从N-端→C-端延长，直至终止密码子前一位密码子所编码的氨基酸。 ;起始(initiation) 延长(elongation) 终止(termination );（一）起始;参与起始过程的蛋白质因子称起始因子（initiation factor，IF）。原核生物起始因子有3种： IF-1：占据A位防止结合其他tRNA。 IF-2：促进起始tRNA与小亚基结合。 IF-3：促进大小亚基分离，提高P位对结合起始tRNA的敏感性。;IF-3;;原核生物mRNA在核蛋白体小亚基上的准确定位和结合涉及两种机制：;S-D序列;mRNA序列上紧接S-D序列后的小核苷酸序列，可被核蛋白体小亚基蛋白rpS-1识别并结合。;IF-3;IF-3;IF-3;指在mRNA模板的指导下，氨基酸依次进入核蛋白体并聚合成多肽链的过程。;原核延长因子;1. 进位; 进位需要延长因子EF-Tu与EF-Ts参与。 ;Tu;2.成肽;成肽的反应过程;3. 转位;EF-G有转位酶（translocase）活性，可结合并水解1分子GTP，释放的能量促进核蛋白体向mRNA的3′侧移动，使起始二肽酰-tRNA-mRNA相对位移进入核蛋白体P位，而卸载的tRNA则移入E位。