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粗毛栓菌LiP的分离与制备精选
粗毛栓菌LiP的分离与纯化 答辩人 指导老师 * * 2010年06月01日 1 研究背景 废弃物的资源化与可再生资源的利用 ,是当代经济与社会发展的重大课题 ,也是对当代科学技术提出的新要求。制浆造纸工业的废液中含有大量的木质素成分，白腐菌是目前己知能够将木质素彻底降解为二氧化碳和水的唯一生物。粗毛栓菌优先降解木质素 ,是生物制浆中原料预处理的优良菌株。因此，研究白腐菌对木质素的降解有利于资源的有效利用和保护环境，对人类社会的可持续发展具有重要的现实意义，其应用前景十分广阔。 木质素过氧化物酶（LiP）最早在白腐真菌中发现，也是目前研究最清楚的木质素降解酶，有研究表明，粗毛栓菌能够产生具有木质素过氧化物酶活性的原酶液，但由于产量较少，尚不能用于大规模高效处理造纸废液。本论文在前人研究的基础上，重点对粗毛栓菌木质素过氧化物酶进行分离纯化工作，并进行酶活测定，进一步探究本实验条件下粗毛栓菌木质素过氧化物酶的产量，对于研究粗毛栓菌木质素过氧化物酶的工业化应用具有重要的理论意义。 2 研究方法 1材料与方法 1.1菌株（Trametes gallica） 1.2主要仪器及试剂 1.3培养基及培养方式 1.4样品的制备 1.4.1粗酶液的制备（过滤 盐析 离心 盐析 离心 透析） 1.4.2酶的超滤浓缩 1.5硫酸铵沉淀 1.6离子交换层析（装柱 平衡 上样 洗脱 测定酶活 透析 浓缩 ） 3 试验流程 产酶培养基 → 浸提 → 超滤 → 盐析 → 透析 → 离子交换柱层析 → 酶活分析 4 实验结果 结果 酶活测定 洗脱曲线 5.粗毛栓菌的Q-Sepharose FF 洗脱曲线 致谢 本论文是在我的导师孙迅教授的精心指导下完成的。我首先要感谢孙老师给我这个宝贵的机会，让我从中我掌握了基本的研究方法和实验技能,学会了如何处理实验中遇到的难题, 更让我明白了进行实验工作的艰辛。在此谨向导师表示崇高的敬意和衷心的感谢！ 本论文的顺利完成，离不开同学和朋友的关心和帮助。感谢和我在一块做论文的王建喜、王晓伟等同学对我默默无闻的帮助，在此表示深深的感谢！ 最后，我还要感谢培养我长大含辛茹苦的父母，一个温馨的家庭是我的坚强后盾，谢谢你们! * * *
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