微生物的实验室培养参考.pptVIP

2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 稀释涂布平板法 稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 （这一方法常用来统计样品中活菌的数目） 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的 微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基 表面形成单个菌落。 稀释涂布平板法 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 微生物的恒温培养 将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱中，培养12h和24h后，分别观察并记录结果。 四、课题成果评价 （一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。 （三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。 菌种的保藏 1、临时保藏：接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。菌落长成后将试管置于4℃冰箱中保藏。以后每3~6个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。但是，这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。 2、长期保存：甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中，装人1 mL甘油后灭菌。将1 mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存。 本课题知识小结: * 专题2 :微生物的培养与应用 微生物包括： 特点： 个体微小；构造简单；进化地位低 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 微生物基础知识 显微藻类 一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌. 菌落： 单个细菌（或其他微生物）细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的子细胞群体，叫做菌落。 细菌菌落 霉菌菌落 菌落是鉴定菌种的重要依据。 （形状，大小，隆起程度, 颜色等） 防止外来杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。 在实验室培养微生物： 一方面：需要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件。 另一方面：需要确保无处不在的其他微生物无法混入（防止外来杂菌入侵）。 一、基础知识： （一）培养基 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 培养基的种类 液体培养基 固体培养基 据物理性质分 天然培养基 合成培养基 据化学成分分 选择培养基 鉴别培养基 据用途分 常用于工业生产 用于菌种分离、鉴定、菌落计数 常用于工业生产 常用于分类、鉴定 在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。例如，在培养基中加入青霉素，以抑制细菌、放线菌的生长，从而分离到酵母菌和霉菌。又如，在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长。 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的微生物。例如，在培养基中加入伊红和美蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌：如果有大肠杆菌，其代谢产物就与伊红和美蓝结合，使菌落呈黑色。 液体培养基 固体培养基 在