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细菌因素在小鼠肝癌发生过程中的作用
内毒素在小鼠肝癌发生过程中的作用
韩殿冰a 曾本华b 葛成果c
【摘要】目的 探讨内毒素在二乙基亚硝铵(DEN)抗内毒素IgYEndotoxin in the pathogenesis of hepatocellular carcinoma in mice Han Dian-bing,Zeng Ben-hua,Ge Cheng-guo Hepatobiliary surgery of Ruzhou Fourth Peoples Hospital of Henan Province,China.467500
【Abstract】 Objective To explore the role of Endotoxin in HCC Induced by the DEN.Methdods Four groups of male mice were fed with DEN. group A is the germ free mice, group B is also the germ free mice injected by endotoxin in abdominal cavity. group C is normal bacterial mice, group D is also normal bacterial mice mice injected by anti-endotoxin IgY in abdominal cavity.Results The highest level of endotoxin in B group and C group had the highest incidence of hepatocellular carcinoma, the lowest level of endotoxin in A group and D group, the incidence of HCC is lowest. endotoxin levels and the incidence of HCC was positively relevance.Conclusion Endotoxin is the root cause of liver cancer.
【Key words】Endotoxin Bacteria DEN HCC
大量资料表明,微生物在癌症的发生中起着重要作用,例如幽门螺杆菌是引起胃癌发生的重要因素[1] ,人类乳头状瘤病毒是引起宫颈癌的重要因素 [2] ,特异性的细菌感染是引起结直肠癌的重要因素[3]。据此我们设想,细菌是否也是引起肝癌的重要因素呢?如果有,那么细菌的代谢产物内毒素,在肝癌的发生中扮演着怎样的角色?于是我们做了如下的实验。
作者单位:a:河南省汝州市第四人民医院肝胆外科467500,b:第三军医大学实验动物研究所,c:重庆医科大学第二附属医院泌尿外科。
材料与方法
1、主要试剂:二乙基亚硝铵(N-Nitrosodiethylamine,DEN)、脂多糖和抗内毒素IgYImmunoglobulin yolk,IgY)均购于北京百灵威科技有限公司。内毒素(LPS E.Coli0111:B4)购自美国Sigma公司。内毒素测定所用试剂盒购自上海伊华临床医学科技公司。
2、动物分组和模型建立:6周龄BaLB/C无菌雄性小鼠20只,购于第三军医大学实验动物所,普通6周龄BaLB/C雄性小鼠20只,购于郑州大学实验动物中心。无菌小鼠饲育于无菌隔离器中,饲养环境为20-23℃,湿度为40%-70%,12h光照:12h黑暗。饲料和垫料均经过60Co-γ50kGy射线辐照灭菌,饮水、鼠笼和饮水瓶等经过高温高压灭菌后传进无菌隔离器。10只无菌小鼠自由饮用浓度为0.01%的DEN液(A组),另10只无菌小鼠在饮用同样浓度DEN液的同时,每日腹腔注射一次脂多糖(0.1mg/Kg)(B组)。10只普通小鼠饮用同样浓度的DEN液(C组),另10只普通小鼠在饮用同样浓度DEN液的同时,每日腹腔注射一次抗内毒素IgYSPSS 19.0软件分析,计量数据以均数±标准差(±S)表示,组间比较采用t检验。计数资料采用%表示,组间比较采用X2校验,多因素相关性分析采用Logistic回归分析,P 0.05为差异具有统计学意义。
结果
1、肝癌发生率:诱癌18周后,停用所有药物一天,第二天所有小鼠剖腹取肝脏,对怀疑肝癌的部位取肝组织做病理切片,结果肝癌发生率A组为0%(0/9),B组为66.7%(6/9),C组为77.8%(7/9),D组为12.5%(1/8)(表1,图1)。取病理前,A、B、C、D四组小鼠分别死亡1、1、1、2只小鼠,死亡时间均发生在诱癌后的3-4周,死亡小鼠取病理
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