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真核细胞内膜系统、蛋白质分选与膜泡运输 细胞质基质和细胞内膜系统的涵义与功能 细胞质基质 （cytoplasmic matrix or cytomatrix） 细胞内膜系统 （endomembrane system） 一、细胞质基质 （cytoplasmic matrix or cytomatrix） 细胞质基质是细胞的重要的结构成分，其体积约占细胞质的一半 ? 基本概念： 用差速离心分离细胞匀浆物组分，先后除去细胞核、线粒体、溶酶体、高尔基体和细胞质膜等细胞器或细胞结构后，存留在上清液中的主要是细胞质基质成分。生物化学家称之为胞质溶胶。 ? 成分：中间代谢有关的酶类、细胞骨架结构。 ? 特点：细胞质基质是一个高度有序的体系；通过 弱键而相互作用处于动态平衡的结构体系 ? 完成各种中间代谢过程 如糖酵解过程、磷酸戊糖途径、糖醛酸途径、糖原的合成与分解、蛋白质的合成等. 参与蛋白质的分选与运输 与细胞质骨架相关的功能 提供锚定位点、维持细胞形态、运动、胞内物质运输能量传递等. ? 蛋白质的修饰、蛋白质选择性的降解 ? 蛋白质的修饰 ? 控制蛋白质的寿命 ? 降解变性和错误折叠的蛋白质→疏水集团暴露在外面 ? 帮助变性或错误折叠的蛋白质重新折叠 二、细胞内膜系统（endomembrane system） 　细胞内膜系统概述 　细胞内膜系统的研究方法 　内膜系统的生物学意义 细胞内膜系统概述 内膜系统使真核细胞区域化(compartmentalization) 细胞内膜系统的研究方法 ? 放射自显影（Autoradiography） ? 生化分析--差速离心分离与功能分析 　　　　　（Biochemical analysis） ? 遗传突变分析（Genetic mutants） 蛋白质糖基化类型 蛋白质的修饰 N－端甲基化：在其侧链的特定位点上进行 糖基化：N－乙酰葡萄糖胺 蛋白质的Ser残基 酰基化 磷酸化和去磷酸化：调节活性 辅酶和辅基的共价结合 Ⅰ.高等细胞区室化 Compartmentalization 质膜 内膜 内质网 高尔基体 溶酶体 过氧化物酶体 线粒体 细胞骨架 中心粒 核糖体 细胞质基质(基质溶胶) 　 通过差速离心分离的微粒体不仅保留了膜的结构特征, 同时还具有活细胞中的生物活性和功能。 微粒体的功能研究 如来自高尔基体的囊泡具有将蛋白质和脂进行糖基化修饰的作用。 用从这些囊泡中分离的特殊蛋白作为抗原制备抗体, 然后将制备的抗体与特定的颗粒如金颗粒结合, 再通过免疫电镜技术就能够对用作抗原的酶进行定位, 通过这些研究详细揭示了高尔基体在复杂的糖装配中的具体过程。 糖基化的作用： 使蛋白质能够抵抗消化酶的作用 赋予蛋白质传导信号的功能 某些蛋白质只能在糖基化以后才能正确折叠 返回 糖基一般连接在4种氨基酸上，分为2种： O－连接 糖基化 N－连接 糖基化 与Ser、Thr和Hypro/Hylys的OH连接，连接的糖类为半乳糖或N-乙酰半乳糖. 在高尔基体上进行O－连接的糖基化. 与Asn的NH2连接，连接的糖类为核苷糖 在内质网上进行的为N-连接的糖基化 真核细胞膜结合区室的主要功能 毒性分子的氧化 过氧化物酶体 进行光合作用 叶绿体 通过氧化磷酸化合成ATP 线粒体 内吞物质的分选 内体 细胞内的降解作用 溶酶体 蛋白质和脂的修饰、分选和包装 高尔基体 大多数脂的合成场所，蛋白质合成和集散地 内质网 基因组存在场所，DNA和RNA的合成地 细胞核 代谢的主要场所；蛋白质合成部位 胞质溶胶 主要功能 细胞器(区室) 内膜系统的特点： 独立性：膜封闭的区室 执行独特的功能 协作性：动态性质（膜流） Ⅰ. 高等细胞区室化 Ⅱ. 内质网 the endoplasmic reticulum ER Ⅲ. 高尔基体 Golgi apparatus Ⅳ. 溶酶体 Lysosome Ⅴ. 过氧化物酶体 Peroxisome Ⅵ. 线粒体 MitochondrionⅦ. 细胞内蛋白运输 Main topics 生物膜 原核细胞 – 质膜构成的单一区室 真核细胞 – 内膜 – 各种细胞器 内膜系统出现的意义： 各自独立，各司其职 相互依存，协调同一 大大提高了细胞代谢反应的效率 细胞 细胞质 细胞核 内膜系统 * * 第七章 第一节 细胞质基质 的涵义与功能 第二节 细胞内膜系统及其功能 第三节 细胞内蛋白质的分选与膜泡运输 细胞质基质