Chapter+10分光光度法-重修.pptVIP

Chapter 10 Absorption Photometry * * 吸光光度法 §10-1 吸光光度法概述 一.定义 根据物质对光的选择性吸收来进行分析的一种方法。 二.分类 ①比色法(colorimetric method) ②紫外—可见分光光度法(ultra violet—visibie spectrophotometry) ③红外分光光度法(infrared spectrophotometry) ④原子吸收分光光度法(atomic absorption spectrophotometry) 三.特点 ①灵敏度高(10-3~10-6mol·L-1) ②准确度高(RE2~5%) ③仪器设备简单，操作简便，测定速度快 ④应用广泛 §10-2 吸光光度法原理 一.光及物质对光的吸收 1.光的性质及电磁波谱 （1）光的性质 （2）电磁波谱 1.0~ 1000m 0.1~ 100cm 50~ 1000 μm 0.76~50 μm 400~760 nm 200~400 nm 10~200 nm 0.1~ 10 nm 10-3 ~ 0.1nm 波长 无线电波 微波 远红外区 近红外区 可见光区 近紫外区 真空紫外区 X射线 ?射线 电磁波 2.物质对光的选择性吸收 （1）分子吸收光谱 吸光质点(水溶液或有机溶剂中):分子或离子 ΔE =hν （2）物质对光的吸收 ①物质对光的吸收是有选择性的。 ②有色溶液的颜色实际上是透过光的颜色，它与被吸收光的颜色成互补色的关系。 红650~750 橙600~650 黄580~600 绿500~580 青490~500 青蓝480~490 蓝450~480 紫400~450 白光 互补色光示意图 单色光(chromatic light)：具有单一波长的光。 复合光(poly chromatic light)：由不同波长的光组成的光。 ③两种适当颜色的单色光按一定强度比例混合可形成白光，这两种单色光称为互补色光。 ④单色光和复合光 （3）光的吸收曲线(absorption curve of light) 吸光度(absorbance)：物质对光的吸收程度。 λmax λ A KMnO4吸收曲线 C1 C2 C3 C4 ①λmax只随物质种类而异，与浓度无关。 ②浓度增大,光的吸收程度增大,但λmax不变。 ③测定时,只有用λmax波长的光,灵敏度最高。 二.光的吸收定律 1.朗伯—比尔定律(Law of Lambert—Beer) A=Kbc b：溶液厚度 c：溶液浓度 T=I/I0 A=－lgT=Kbc 2.吸光系数和摩尔吸光系数 吸光系数(K)：单位L·g-1·cm-1 ,A=abc. 超高灵敏度 高等灵敏度 中等灵敏度 灵敏度低 ε＞ 105 5×104 ＜ε＜ 105 104＜ε＜5×104 ε＜104 摩尔吸光系数(ε) :单位L·mol-1·cm-1，A=εbc。 3.偏离朗伯—比尔定律的原因 正偏离 负偏离 A 浓度c （1）非单色光引起的偏离 A=εbc=K′c （2）由于溶液本身的物理或化学因素引起的偏离 ①介质不均匀引起的偏离 ②溶液稀释后吸光质点总数发生变化 ③被测溶液浓度过大引起的偏离 被测溶液浓度小于0.01 mol·L-1时不会引起偏离。 §10-3 显色反应和显色条件的选择 一.显色反应的选择 1.灵敏度高 一般要求ε值为104~105。 2.选择性好 指显色剂仅与一个组分或少数几个组分发生显色反应。 3.有色化合物的组成恒定、性质稳定 4.有色化合物与显色剂之间色差要大(即显色剂在测量波长附近无明显吸收) M + R ? MR 被测组分 显色剂 有色化合物 二.显色条件的选择 1.显色剂的用量 M + R ? MR 被测组分 显色剂 有色化合物 A A A c（R） c（R） c（R） a b a′ b′ (1) (2) (3) 2.溶液的酸度 M n+ + nR- ? MRn H R（显色剂） ? H+ + R- 3.温度 作A—T曲线确定最佳温度。 4.显色反应时间 作A—t曲线确定最佳显色时间。 作A—pH曲线确定显色反应最适宜的酸度范围。 三.干扰离子的消除 （1）控制酸度 （2）加掩蔽剂 （3）分离干扰离子 （4）可通过实验寻找适宜的波长或参比溶液或其它测定条件。 四.吸光度测量条件的选择 1.入射光波长的选择 依据：作吸收曲线,以λmax为测量的入射波长。 2.参比溶液的选择 ①作用 用来调节测定零点(A=