红酒中种合成着色剂检测.docVIP

红酒中八种合成着色剂检测 一、样品信息 样品组分 结构式 柠檬黄 新红 苋菜红 靛蓝 胭脂红 日落黄 诱惑红 亮蓝 二．实验目的 参照《食品中合成着色剂的测定》（GB/T5009.35-2003），建立红酒中的合成着色剂的SPE-HPLC检测方法。 三．实验方法 3.1实验试剂 乙酸； 甲醇； 乙酸铵溶液（0.02mol/L）：称取1.54g乙酸铵，加水溶解并稀释至1000ml； 氨水溶液：量取氨水2ml，加水至100ml，混匀； 甲醇/甲酸（6+4）溶液：量取甲醇60ml，甲酸40ml，混匀； 柠檬酸溶液：称取20g柠檬酸，加水至100ml溶解，混匀； 无水乙醇-氨水溶液-水：量取无水乙醇70ml，氨水溶液20ml、水10ml，混匀； 水（PH=6.0）：水加柠檬酸溶液调节PH=6.0； 水（PH=4.0）：水加柠檬酸溶液调节PH=4.0； 水：超纯水 合成着色剂储备液：每1.0ml中含柠檬黄、新红、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝各0.5mg，诱惑红0.1mg的水溶液； 合成着色剂使用液：上述合成着色剂储备液逐级稀释成每1.0ml中含柠檬黄、新红、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝各5ug，诱惑红1ug的水溶液； 3.2.实验耗材 名称 规格 订货号 Venusil? XBP C18 5um，100A，4.6*150mm VX951505-0 保护柱芯 4.6*10mm，4/pk VX950105-0 保护柱套 适用于4.6*10mm的保护柱芯 CH-100 Cleanert? JAX 1g/6ml，30/盒 JXA0006 Hydrophilic PTFE 0.45um，13mm，100/包 AS081345 3.3.试样处理 取试样（某品牌红酒）20ml,加入合成着色剂混标溶液1.0mL，混匀，用10%氨水调节PH约6.0，将全部试样经过Cleanert? PA SPE柱，分别用水（PH=4.0）、甲醇/加酸（6+4）溶液6ml淋洗，再用10ml水淋洗，用乙醇-氨水溶液-水（7+2+1）6ml洗脱，收集洗脱液于50℃水浴蒸发至干，加水定容至1.0ml，经0.45um滤膜过滤，待测。 3.4液相色谱条件 色谱柱：Venusil? XBP-C18，5um；4.6*150mm； 流动相：A：0.02mol/L的乙酸铵溶液（乙酸调节pH=4）； B：甲醇 流 速：1.0ml/min； 进样量：20μl； 波 长：254nm； 梯 度： 时间 A% B% 0 95 5 10 80 20 18 40 60 25 40 60 25.01 95 5 40 95 5 四．实验结果 表1.添加5ppm混标峰面积数据 样品组分 标品 标样过柱1 标样过柱2 红酒样品1 红酒样品2 柠檬黄 318 320 315 294 324 新红 471 474 461 482 473 苋菜红 266 269 262 277 279 靛蓝 314 282 279 273 275 胭脂红 266 267 263 246 240 日落黄 234 238 234 210 212 诱惑红 33 33 33 35 34 亮蓝 39 40 39 37 37 表2.添加5ppm混标回收率数据 样品组分 标样过柱1（%） 标样过柱2（%） 红酒样品1（%） 红酒样品2（%） 柠檬黄 100.6 99 92.5 102 新红 100.6 97.8 102 100 苋菜红 101 98.5 104 105 靛蓝 89.8 88.8 86.9 87.5 胭脂红 100.3 98.8 92.5 90.2 日落黄 101 100 90 90.6 诱惑红 100 100 106 103 亮蓝 102 100 95 95 五、实验结论 实验结果表明，Cleanert? PA-SPE小柱和Venusil? XBP-C18液相色谱柱可以用于红酒中的合成着色剂的检测，该方法快速、准确。 六、注意事项 红酒样品呈弱酸性，在上样之前要将其pH值调节至6左右，保证小柱可对合成着色剂有良好地吸附； 若样品酒精度过高，建议在上样前对样品进行除醇处理； SPE小柱净化过程中，要注意对流速的控制，建议控制在1ml/min左右； 洗脱液氮吹复溶后，应选用水系滤膜过滤，防止因滤膜吸附造成样品的损失，建议选用Agela Hydrophilic PTFE滤头。 附录： 图1 5ppm混标溶液 图2 5ppm混标过柱1 图3 5ppm混标过柱2 图4 红酒空白图谱 图5 5ppm基质加标1 图6 5ppm基质加标2 网站宣传：公司主站、仪器信息网、中国色谱网、化工仪器网、仪器信息网论坛