mir-92b对神经胶质瘤细胞u251增殖及迁移侵袭的影响.pdfVIP

Journal of Neuroscience and Mental Health，2017，Vol.17，No.9 ·论著· miR-92b对神经胶质瘤细胞U251增殖及迁移侵袭的 影响 王宇 康鹏 【摘要】 目的 探究miR-92b 对神经胶质瘤细胞U251 增殖及迁移侵袭的影响以及其可能机制。方 法 利用miRNA 芯片筛选出在神经胶质瘤细胞U251 和人脑正常胶质细胞HEB 中差异表达的miRNA ；化 学合成法制备miR-92b 抑制剂，转染后用real-time PCR 技术验证表达变化；CCK-8 实验检测转染后细胞 的增殖能力；划痕实验和Transewll 实验检测转染后细胞的迁移和侵袭能力；Western blot 检测细胞中胰岛 素样生长因子结合蛋白3（IGFBP-3）、β-catenin 和E-cadherin 的表达；荧光酶素实验验证IGFBP-3 是否为 miR-92b 的靶基因。结果 基因芯片结果显示miR-92b 在神经胶质瘤细胞中表达水平高于人脑正常胶质 细胞（P ＜0.05）；CCK-8 实验结果显示转染miR-92b 抑制剂后，U251 细胞增殖能力降低（P ＜0.05）；划痕实 验和Transwell 实验结果显示转染miR-92b 抑制剂后，U251 细胞迁移和侵袭能力降低（P ＜0.05）；Western blot 结果显示抑制miR-92b 后，IGFBP-3 和E-cadherin 蛋白表达增加（P ＜0.05），β-catenin 表达减少 （P ＜0.05）；荧光素酶实验结果显示，miR-92b 能直接靶向调控IGFBP-3 。结论 miR-92b 在神经胶质瘤 中表达显著增加，其可能通过抑制IGFBP-3 蛋白表达，从而促进肿瘤细胞的增殖及迁移侵袭。 【关键词】　神经胶质瘤； miR-92b ； IGFBP-3 ； 增殖； 迁移； 侵袭 - doi ：10.3969/j.issn.1009 6574.2017.09.003 Effects of miR-92b on proliferation ， migration and invasion of glioma cell line U251 WANG Yu ， KANG Peng. Department of Neurosurgery ， Beijing Tiantan Hospital ， Capital Medical University ， Beijing 100050， China 【Abstract 】　Objective　To investigate the effect of miR-92b on proliferation ， migration and inva- sion of U251 cells and its possible mechanism. Methods　The differential expression of miRNA in glioma cell line U251 and human normal glial cell line HEB was screened by miRNA chip. miR-92b inhibitor was synthe- sized by chemical synthesis ， the expression changes were verified by real-time PCR after transfection. Cell pro- liferation ability was detected by CCK-8 assay after transfection. Wound healing assay and Transwell assay were used to detected cell migration and invasion ability after transfection. Western blot was