《非发酵菌群》.docVIP

第七节 非发酵菌群 一、概 述 所谓非发酵菌群是指一大群不发酵葡萄糖，需氧或兼性厌氧的无芽胞革兰阴性菌。近年来，由于广谱抗菌药物、免疫抑制剂和抗肿瘤药物的广泛应用，导致机体微生态失调和抵抗力下降，非发酵菌引起机会感染或医院内感染日益增多，如败血症、呼吸系统或泌尿系统感染、伤口及皮肤感染、脑膜炎及角膜溃疡等。 由于该群细菌生化反应之间共性少，根据科-属-种的鉴定程序，选用葡萄糖氧化发酵（O/F试验）、氧化酶试验、动力、菌落色素等试验，必要时可做鞭毛染色观察。氧化-发酵（O/F）试验对非发酵菌群的鉴定非常关键，试验培养基中的蛋白质浓度是2g/L，而不是10g/L，可避免细菌利用蛋白质所产生的胺中和分解糖产生的酸，造成错误判断成不利用糖。多数非发酵菌广泛存在于自然界，培养和鉴定温度应选与自然界环境温度相适应的30℃为宜，动力检查应培养于18℃~20℃，在此温度下有利于其鞭毛蛋白的合成。多数非发酵菌氧化酶试验阳性。 非发酵菌的鉴定可选用目前公认质量好的市购成套专用试剂盒如API—20NE等进行编码鉴定，，也可用自动化仪器如Vitek、Biolog、Microscan、Sceptor等鉴定。 非发酵菌群属间生物学特性的主要区别见表6-7-53。 表6-7-53 非发酵菌群属间生物学特性的主要区别 试 验 菌 属 假单胞菌属 黄杆菌属 不动杆 菌属 产碱杆 菌属 丛毛菌属 摩拉菌属 氧化酶试验 + + - + + +/– 葡萄糖试验O/F 0/- - /0 0/- - - – 动 力 +/- - - + + – 菌落色素 不定 橙黄色 无色 无色 淡黄色 无色 鞭毛部位 端毛 - - 周毛 丛毛 – 注：“+ 表示90%以上的菌株阳性；－ 表示90%以上的菌株阴性；O/- 表示氧化葡萄糖/不发酵葡萄糖；-/O表示不氧化葡萄糖/发酵葡萄糖；+/－表示多数菌株(90%以下)阳性，少数菌株阴性；－/+表示多数阴性二、假单胞菌属 （一）生物学特性 本属细菌为革兰阴性、直或微弯杆菌，较细长、专性需氧，在普通培养基上能生长。大多数菌种有动力，有鞭毛、无荚膜和芽胞、氧化酶阳性（少数也可阴性）。 铜绿假单胞菌是临床最常见的分离菌，在血平板上35℃培养18h～24h后，形成大而扁平、湿润、有金属光泽、有生姜味的灰绿色或兰绿色的菌落（也可以产生荧光素、红脓素等），大部分形成透明溶血环。 荧光假单胞菌的最适生长温度为25℃~30℃。部分假单胞菌属在35℃培养时不能生长，室温过夜时，则见到生长的菌落。 铜绿假单胞菌具有O抗原和H抗原。应用O抗原可对铜绿假单胞菌进行血清分型，目前可分为20个血清型。 （二）微生物学检验 临床常见假单胞菌的生物学特性鉴定见表6-7-54。 铜绿假单胞菌的绿脓素鉴定 用氯仿提取液提取色素后，加入1mol/L盐酸呈粉红色，即为绿脓素，为铜绿假单胞菌所特有。有荧光素的假单胞菌属荧光群只有三个种，可用42℃生长试验、硝酸盐产气、明胶液化以及乙酰胺水解试验鉴别见表6-7-54。  表6-7-54 临床常见假单胞菌的主要生物学特性鉴定 菌 种 麦 芽 糖 葡 萄 糖 O N P G 荧 光 素 绿 脓 素 氧 化 酶 硫化氢 精 氨 酸 双 水 解 酶 赖氨酸 鸟 氨 酸 七 叶 苷 明 胶 乙 酰 胺 对多粘菌素敏感 鞭 毛 数 目 铜绿假单胞菌 + －/+ － +/－ +/－ + － + － － － +/－ + + ≤3 荧光假单胞菌 + －/+ － + － + － + － － － + － + 1 恶臭假单胞菌 + －/+ － +/－ － + － + － － － － － + 1 嗜麦芽窄食假单胞菌 + + + － － － － － + － + + － + 1 洋葱假单胞菌 + + +/－ － － + － － + +/－ +/－ +/－ +/－ － 1 腐败假单胞菌 + +/－ － － － + + － － － － － － + 1 斯氏假单胞菌 + + － － － + － － － － － － － + 1 产碱假单胞菌 － － － － － + － － － － － － － + 1 食酸假单胞菌 － － －- － － + － － － － － － + +/－ 1 睾丸酮假单胞菌 － － － － － + － － － － － － － +/－ 1 鼻疽假单胞菌 + + － － － +/－ － － － － － － － － － 注：+ 表示90%以上的菌株阳性（或发酵糖）；－ 表示90%以上的菌株阴性（或不发酵糖）；+/－ 表示多数菌株(90%以下)阳性（或发酵糖），少数菌