动物细胞培养动物细胞核移植.ppt

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动物细胞培养动物细胞核移植

动物细胞工程常用的技术手段: 动物细胞培养、 动物细胞核移植、 动物细胞融合、 单克隆抗体 问题讨论: 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植,但对于大面积烧伤病人来讲,健康皮肤很有限,请同学们想一想如何来治疗该病人? 探究 探究 探究 探究 一、动物细胞培养 1.概念: 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 2、过程 动物细胞培养的过程: 有关概念 原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。 有关概念 4、应用 大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体) 作为基因工程中的受体细胞 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性 用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据 动物体细胞核移植技术: 将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 二、动物细胞融合 1.概念:指用自然或人工方法、使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程,又称为体细胞杂交 杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。 2. 细胞融合方法 化学:PEG(聚乙二醇) 物理:电融合 生物:灭活的病毒(仙台病毒) 和植物细胞融合有什么区别: 二、动物细胞融合 细胞核 病毒颗粒 细胞核 灭活的病毒颗粒黏附在细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿过 细胞膜连接 二、动物细胞融合 细胞融合,形成杂种细胞 仙台病毒 紫外线 丧失感染性 (不感染细胞) 保留融合活性 (诱导细胞融合) 植物体细胞杂交过程: * * 合肥市第十三中学 孙红霞 选修3 现代生物科技专题 专题2 细胞工程 学习目标: 【知识能力】 1、动物细胞培养的过程、条件及应用 2、应用细胞的基础知识,分析细胞工程的理论基础 【情感态度与价值观】 1、讨论细胞工程技术的社会意义 2、认同细胞学基础理论研究与技术开发之间的关系 植物细胞工程常用的技术手段有哪些? 植物组织培养、 植物体细胞杂交 强调: 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 动物细胞培养发展历史 20世纪初,人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形成的,还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。1907年,美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织,把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周,并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题,而且开创了动物组织培养的先河。此后,在许多科学家的不懈努力下,动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。 补充: 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植 1、植物组织培养过程要将组织分散成单个细胞吗? 2、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞吗? 3、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢? 4、如何将动物组织分散成单个的细胞呢? 5、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份? 没有 是 成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖 先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理 胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质 6、细胞膜的主要成份是什么? 7、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗? 8、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉,那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢? 9、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么? 10、动物细胞培养取材时,一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官,请解释原因? 蛋白质和磷脂 能 注意时间的控制 不能,因为动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛 11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒? 12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖? 13、如此时细胞数量并未达到人们的需求,应该怎样办? 易于培养细胞贴壁,进行生长增殖 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞分裂就会停止分裂增殖,这种现象叫接触抑制。 将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖。 这样的过程叫做传代培养 14、如何理解原代培养和传代培养? 15、传代

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