RIBOSOME DISPLAY - ASTER Internet, Telewizja, Telefon 核糖体展示- ASTER互联网，telewizja，电话.pptVIP

RIBOSOME DISPLAY Dlaczego inne metody s? gorsze? hybrydomy Bia?ko musi by? immunogenne ale nie mo?e by? letalne Otrzymane przeciwcia?a s? pochodzenia zwierz?cego Faktyczne powinowactwo przeciwcia? produkowanych in vivo nie przekracza 1010 M-1 (wy?sze powinowactwo nie jest korzystne) Metoda czaso- i pracoch?onna Dlaczego inne metody s? gorsze? Phage display Limit transfekcji – wielko?? biblioteki 1010 Bia?ko nie mo?e by? toksyczne dla bakterii Trudno?? elucji fagów nios?cych przeciwcia?a z wysokim powinowactwem Wprowadzanie ka?dej mutacji w genie koduj?cym przeciwcia?o wi??e si? z rozpocz?ciem pracy od pocz?tku Metoda czaso- i pracoch?onna Okazuje si?, ?e: Istnieje mo?liwo?? kotranslacyjnego zwijania bia?ka in vitro Uwolnienie z rybosomu nie jest konieczne do prawid?owego zwijania bia?ka Bia?ko zwi?zane do rybosomu mo?e wykazywa? aktywno?? biologiczn? RD? Co to takiego? Ribosome display to pierwsza metoda screeningu bibliotek (np. HuCAL) i otrzymywania funkcjonalnych bia?ek, prowadzona w ca?o?ci in vitro; powstaj?ce bia?ko jest aktywne, jednocze?nie pozostaj?c przyczepionym do kompleksu rybosomu i mRNA. Sk?d wzi?? DNA przeciwcia?a? Wyizolowa? pul? limfocytów Skorzysta? z DNA przeciwcia?a otrzymanego inn? metod? Human Combinatorial Antibody Library (HuCAL) - 7 cz??ci zmiennych ?ańcuchów ci??kich (VH1A, VH1B, VH2-6) i 7 cz??ci zmiennych ?ańcuchów lekkich (Vκ1- Vκ4; Vλ1 – Vλ3) w 49 kombinacjach - Ró?norodno?? przeciwcia? wynika ze zmienno?ci w obr?bie CDR3, dlatego te? CDR3 w tej bibliotece to po prostu przypadkowe trójki nukleotydów - Mo?liwo?? otrzymania praktycznie ka?dego przeciwcia?a 3 podstawowe problemy w RD: Bia?ko b?d?c przyczepionym do kompleksu, musi by? jednocze?nie prawid?owo zwijane ?ańcuch bia?ka nie mo?e opu?ci? kompleksu mRNA nie mo?e opu?ci? kompleksu Rola kodonu STOP Gdy pojawia si? kodon STOP, wtedy kompleks dwóch czynników uwalniaj?cych (RF) wi??e si? w miejsce tRNA Uwolnienie bia?ka mRNA w ribosome di