如何使用SpectraMaxM5多功能微孔板读板机和IMAP荧光偏振检测.PDF

® 如何使用SpectraMax M5 多功能微孔板读板机 和IMAP® 荧光偏振检测平台进行激酶活性的分析 SPECTRAMAX APPLICAT ION NOT E #6 By Cathy Olsen, Ph.D., Molecular Devices 筛选时，SpectraMax M5多功能微孔板读 Corporation, 1311 Orleans Drive, Sunnyvale, 板机可作为其非常理想的、可靠的检测平 CA 94089. 台。SpectraMax M5是一种基于光栅型单 介绍 色器的多功能微孔板读板机，允许使用者针 蛋白激酶在调节许多细胞反应过程时起着核 对不同的荧光染料分子随意选择不同的检测 心的作用。近年来已经成为癌症和其它许多 波长，而无需额外再选购滤光片配件。这篇 疾 病 药 物 重 要 的 作 用 靶 点 。 I M A P 是 应用文章详细的描述了在进行IMAP荧光偏 Molecular Devices 公司推出一种快速、非 振激酶试验时，如何使用SpectraMax M5 放射性的激酶检测技术，由于技术本身特点 多功能微孔板读板机和 SoftMax® Pro 软件 其非常适合用于进行试验优化和高通量的筛 进行检测和分别对红色及绿色荧光底物来校 选。 IMAP检测技术基于的原理是磷酸根离 正曲线。LCK是一种酪氨酸酶，在T细胞信 子与表面固化有三价金属离子的纳米球颗粒 号转导通路中发挥着非常关键作用，制备其 的一种结合作用。当这种结合反应发生后， 稀释曲线。另外Akt1/PKBa，一种丝氨酸- 荧光标记的多肽分子的运动轨迹发生了改 苏氨酸激酶，参与磷脂酰肌醇激酶3的信号 变，荧光标记复合物的荧光偏振值就会增加 转 导 和 细 胞 活 力 。 通 过 十 字 孢 碱 抑 制 (SeeFigure 1.)。因为是一种均相的，可忽 A k t 1 / P K B a 的 试 验 中 ， 计 算 F A M 和 视底物多肽序列的一种检测方法，所以可广 TAMRA分别标记的多肽底物在反应过程始 泛的应用于多种激酶的检测。 中获得的Z因子值，其结果与滤光片式多功 能微孔板读板机上获得的结果相一致。 当使用 IMAP技术进行试验优化和高通量的 材料 I M A P 快 速 筛 选 试 剂 盒 (