苹果果腐病菌检疫鉴定方法编制说明.doc

《苹果星裂壳孢果腐病菌检疫鉴定方法》编制说明 负责起草单位：广东出入境检验检疫局主要起草人：王卫芳 （2011年月日目的意义可通过苗木和接穗进行远距离，通过水果贸易进行跨国传播入侵风险极高，对我国苹果生产存在潜在的威胁。满足口岸检疫工作需要2. 任务来源 本标准制定任务由中国国家认证认可监督管理委员会于20年下达，《苹果星裂壳孢果腐病菌检疫鉴定方法》被列为国家出入境检验检疫行业标准制订项目，计划编号为：。3. 主要起草人及其承担的工作 王卫芳 广东出入境检验检疫局研究员，主持标准起草 广东出入境检验检疫局农艺师，参与标准修改和补充工作胡佳 广东出入境检验检疫局助理农艺师，参与标准工作广东出入境检验检疫局助理农艺师，参与标准修改和补充工作4. 编制过程 接到国家认监委下达的任务后，由广东出入境检验检疫局技术中心牵头成标准起草工作小组，讨论和研制了标准编制计划、编制方法和步骤；通过国际互联网检索，大量收集、系统整理并全面分析苹果星裂壳孢果腐病菌相关文献资料，提炼了该病菌形态特征、危害、地理分布、生物学特性、检疫和鉴定方法相关信息；同时菌株，开展了病菌培养特性和形态学特征实验充分借鉴文献资料，确定了苹果星裂壳孢果腐病菌的检疫鉴定方法和鉴定特征，在现场查验和实验室检验中反复实践，对检疫鉴定方法和技术进行优化，依据有害生物鉴定术语等相关国家标准，根据苹果星裂壳孢果腐病菌分布、寄主、为害症状、病菌形态特征、病原菌分离培养性状、生物学特性相关资料，从现场查验对该病菌鉴定方法进行详细的描述，制定相关的鉴定标准，编制标准文本草案（征求意见稿）。2010年月日征求意见稿广泛征求意见征求意见稿修改标准文本，2011--24提交审核5. 标准的编制原则 5.1 起草小组按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则》的要求和格式，起草了《苹果星裂壳孢果腐病菌检疫鉴定方法》征求意见稿。 5.2 本标准的编制充分考虑了标准必须具备的包容性、先进性、实用性和可操作性等特点, 规范了苹果星裂壳孢果腐病菌检疫鉴定的程序和方法，确保本标准能在全国质检系统及相关领域和部门实施，有效发挥口岸检验检疫的把关作用。 6. 标准的主要技术内容及确定依据说明 6.1范围 本标准规定了的检疫鉴定方法。 本标准适用于果实苹果果腐病菌的检疫鉴定。 6.2检疫鉴定原理 苹果星裂壳孢果腐病英文名：speck rot on apple；Phacidiopycnis rot on apple，苹果星裂壳孢果腐病菌，学名：Phacidiopycnis washingtonensis Xiao J.D Rogers 2005，在分类上隶属于半知菌亚门（Deuteromycotina）、腔孢纲（Coelomycetes）、球壳孢目（Sphaeropsidales），球壳孢科（Sphaeropsidaceae），星裂壳孢属（Phacidiopycnis）性 在培养条件下，病菌可产生分生孢子器和分生孢子。本标准充分考虑了该病菌的形态特征、培养性状和生物学特性，并对其地理分布、寄主范围和症状等进行描述。以寄主的症状特点、病菌形态学特征、培养特性作为苹果星裂壳孢果腐病菌的检疫鉴定依据，病菌ITS序列分析作为苹果星裂壳孢果腐病菌的辅助检疫鉴定依据。 6.3 结果判定 苹果星裂壳孢果腐病菌与其近似种梨波氏盘果腐菌（Phacidiopycnis pyri）在形态上有相似之处，主要区别为苹果星裂壳孢果腐病菌分生孢子器单腔室或多腔室，半埋生或几乎表生，只产生一种类型孢子。而梨波氏盘果腐菌分生孢子器多腔室，埋生、半埋生，可产生大、小两种类型的孢子，并且其分生孢子的形态及大小与苹果星裂壳孢果腐病菌均有差异，另外两种病菌的ITS序列存在四个碱基位点的差异（参见附录D），BLAST分析病菌与GenBank中已知的苹果星裂壳孢果腐病菌的CLX2151、CLX2152、LX2520、CLX2521、CLX2527、CLX2528等6个菌株的ITS1-5.8S r RNA-ITS2全序列AY608643、AY608644、AY608645、AY608646、AY608647、AY608648的同源性均为100%。ITS系统发育分析病菌菌株与GenBank中苹果星裂壳孢果腐病菌聚在同一簇，支持度为100%，与梨波氏盘果腐菌相邻但不聚在同一簇，而与其他亲缘关系较低的种属距离远。 苹果星裂壳孢果腐病菌的检疫鉴定主要依据病菌症状特、形态学特征辅助依据分子生物学特征6.4仪器和药品方面：列出实验室检验所涉及的内容。6.5样品保存：根据苹果星裂壳孢果腐病菌的特性而确定。一般采用菌种常规保存方法。6.6附录：为了标准的简洁、准确、重点突出和连贯性，将背景材料置于附录包括资料性附录和规范性附录，作为参考。7. 采标情况 目前