人类胎盘促乳激素与人类促乳激素穿插嵌合重组蛋白.pptVIP

人類胎盤促乳激素與人類促乳激素穿插嵌合重組蛋白 對人類促乳激素接受體 結合能力與抗乳癌相關機制之研究 藍珮菁 Pei-Ching Lan 張正教授 Advisor: C.Allen Chang National Chiao Tung University Biological Science and Technology 研究背景胎盤及胎盤素 中國的漢方醫學寶典本草綱目中，對於乾燥胎盤 -紫河車有記載 胎盤是母體傳遞胚胎生長發育所需物質的通道 前四週發育快速… 胎盤素之功效，廣為生醫界所研究，其具有幫助細胞新生、及增強免疫機能等功效 風濕性關節炎 研究背景胎盤及胎盤素 研究背景胎盤促乳激素（Placenta Lactogen）與促乳激素(Prolactin) 胎盤促乳激素（Placenta Lactogen, PL） 22.3kDa蛋白質 只由胎盤生產 初期了解可促進母體乳腺之生長與乳汁之生產。 促乳激素(Prolactin, PRL) 腦下垂體前葉所分泌 22.5kDa蛋白質 在生產後調控乳汁中之酪蛋白(casein)與乳蛋白素(lactabumin)之製造以及乳汁分泌。 研究背景促乳激素與訊息傳遞 研究背景促乳激素與訊息傳遞 研究背景胎盤促乳激素（Placenta Lactogen）與促乳激素(Prolactin) 訊息傳遞: JAK2 kinase-STAT路徑、ras-MAPK路徑 最近一些研究報告指出，促乳激素會影響thymic stromal cell的 IL-1與IL-6的表現量，進而影響T細胞的分化。IL-6在體外試驗上也表現出抑制鼠的胎盤促乳激素的分泌量。顯示促乳激素與細胞動素亦有關連，但其機制尚不清楚。 最近的研究顯示促乳激素與乳癌有其相關性 研究背景乳癌與乳癌用藥 乳癌在國人及世界婦女癌症中，一直佔有很高的比例。 乳癌：乳房乳腺管細胞或是腺泡細胞經由不正常分裂、繁殖所形成之惡性腫瘤。 乳癌的治療：開刀、放射線治療、化學治療與荷爾蒙療法 研究背景乳癌與乳癌用藥 化學治療藥物：fluorouracil（5-FU）與anthracycline(ex. doxorubicin)為第一線藥物 荷爾蒙療法：以對抗動情激素接受體(estrogen receptor)的藥物為主，如tamoxifen。 衛生署藥政處通過用於治療乳癌的新藥： 化學療法：太平洋紫杉醇 （Taxol）、歐洲紫杉醇 （Taxotere）、滅癌平（Navelbin）與截瘤達（Xeloda） 荷爾蒙療法：安美達（Arimidex）。 研究背景乳癌與乳癌用藥 目前對乳癌的荷爾蒙療法主要是以對抗動情激素接受體(estrogen receptor，ER)的藥物為主--無法完全抑制乳癌細胞的成長。 Tamoxifen 亦會抑制由促乳激素引發的 ER-negative Nb2 rat lymphoma cells的生長。--ER以外的receptor 在一些報告中指出促乳激素(PRL)可能為對抗乳癌的另一個目標。 會過量表現促乳激素的基因轉殖鼠在11至15月齡即出現乳癌腫瘤—PRL有影響 經由蛋白質水解酵素水解的促乳激素片段，可表現出有抑制血管新生的作用—PRL有影響 研究背景乳癌與乳癌用藥—接受體 PRL對抗乳癌的接受體研究： Dopamine receptor 但由最近的研究報告指出其與乳癌的相關性小，所以抑制Dopamine receptor對治療乳癌可能是無效的 。 PRL receptor： PRL 專一結合，抗乳癌接受體目標 PL、GH 也會與PRL receptor binding PLPRLGH 研究背景擬解決問題 針對PRL receptor研究抗乳癌藥物 利用PL與PRL特性研發不產生生理功用的蛋白質 蛋白質片段：成分複雜不易控制 嵌合重組：可掌握蛋白質性質 研究背景基因隨機的嵌合重組 相關的基因做隨機的嵌合重組，可以得到多樣化的新型基因，而成為一組新蛋白質的基因庫。 Gene shuffling為一快速產生chimerical library的方法。 研究背景基因隨機的嵌合重組 工作項目及實施方法 1.人類促乳激素接受體(hPRL receptor)基因分子選殖 為了進行重組促乳激素的篩選，本實驗室必須有促乳激素接受體基因以表現其蛋白質。 工作項目及實施方法 2.人類促乳激素(hPRL)之基因分子選殖與蛋白質表現 為了進行重組促乳激素的篩選，以及測試將來進行shuffling重組時的PCR條件，本實驗室亦進行促乳激素基因選殖，並可將其表現之蛋白質與市售隻促乳激素蛋白質加以比較。 工作項目及實施方法 3.hPL與 hPRL gene shuffling 0.005U